目录:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物学试剂>>试剂盒>> 外泌体 DNA-RNA 纯化试剂盒(沉淀法)
供货周期 | 现货 | 规格 | 50次 |
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货号 | XY-D-1826 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
主要用途 | 科研 | 英文名称 | / |
保存条件 | 常温 | 有效期 | 1年 |
产品简介:
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (40-100 nm),主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体, 且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关其分泌、摄取、组成、“运载物"及其相应功能的精确分子机制的研究还处于起步阶段。但从外泌体提取核酸(主要是 RNA)非常棘手,为此本公司开发了外泌体核酸(DNA 和 RNA) 纯化试剂。
产品特点:
1.一管式操作,在同一试管中完成,减少样品丢失。
2.沉淀法,不使用离心柱,能有效避免小 RNA 的丢失。
3.能同时提取 RNA(包括 RNA 和 miRNA)和 DNA。
4.回收率达到 90%以上,高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
5.无毒环保,不需要使用苯-酚和氯仿等有毒的有机溶液。
6.外泌体 DNA-RNA 纯化试剂盒(沉淀法)只能用于科研,不能。用于临床。
产品参数:
成份规格包装材料
外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 A30 mL30 mL 本色瓶
外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 B35 mL60 mL 本色瓶
外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 C50 mL60 mL 本色瓶
RNase-free 水1 mL1.5 mL 本色管
使用手册1 份1 份
运输及保存
常温运输保存,但外泌体核酸提取溶液 A 长期保存需要放 4℃。有效期一年。
自备试剂
外泌体。
使用方法:
制备外泌体(本试剂盒不提供相关试剂)
注意:自备的外泌体需要立即使用或放-80℃长期保存。用于核酸提取的外泌体可以是沉淀,也可以是重悬液。
二、外泌体核酸提取
1.从冰箱取出外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 A,放室温或握在手上融化,直到没有任何晶体,再充分摇匀待用。
2.标记 1.5-2 mL 螺旋盖塑料离心管。为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。最好在每个管盖上做个标记,以在下步离心时有意将标记方向朝向心面或离心面。
3.将不超过 200 μL 的外泌体重悬液加入到标记好的塑料离心管中。
4.每管中加入 600 μL 外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 A,盖上盖子后振荡数秒混匀。
5.室温放置 3 分钟。
6.加入 0.7 mL 外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 B,旋紧盖后振荡 30 秒混匀。
7.14,000×g 室温离心至少 15 分钟。注意:离心时如果把标记固定朝向心面或离心面,则在后面的操作均得按此朝向进行离心。
8.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的核酸沉淀(此时可能看不见)。
9.加入 1.0 mL 外泌体 DNA-RNA 纯化溶液 C, 振荡数秒.
10.14,000×g 室温离心 5 分钟。
注意:离心管标记的朝向要跟上面的一致。
11.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的核酸沉淀(可能在离心管内壁的离心面呈膜状)。
12.再短暂离心数秒, 用移液器移弃残留液体(约 50 μL)。
13.加入 200 μL RNase-free 水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状沉淀。如果溶液稍呈混浊状属于正常。
注意:所得溶液即为外泌体核酸溶液。如果只需要 RNA,必须去除 DNA,则另外
用自备的 RNase-free DNase 对 DNA 污染进行降解。反之如果只需要 DNA,必须去除 RNA,则另外用自备的 DNase-free RNase 对 RNA 污染进行降解。
14.直接取适量用于后续实验。样品可以室温放置 2 小时,也可保存于-80℃保存一个月。
选择我们的外泌体 DNA-RNA 纯化试剂盒(沉淀法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!