目录:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物学试剂>>试剂盒>> 血液 RNA 纯化试剂盒(过柱法)
供货周期 | 现货 | 规格 | 50次 |
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货号 | XY-D-1824 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
主要用途 | 科研 | 英文名称 | / |
保存条件 | 常温 | 有效期 | 1年 |
产品简介:
本产品专门从动物全血样品中快速提取总 RNA。
产品特点:
1.直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需裂解红细胞等预处理步骤, 整个提取过程只需要十分钟左右。
2.可以全在室温下进行。
3.产量和纯度高。OD260/280 一般在 2.0 左右,产率一般为 2-5 μg/mL人血,可以直接用于 RT-PCR 和 Northern 杂交等研究。
4.每次微量提取的最大样品处理量可以达到 1.5 mL,高于大多数同类产品。
5.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸钠,草酸钠)兼容。
6.血液 RNA 纯化试剂盒(过柱法)只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
血液 RNA 纯化溶液A50 mL60 mL 本色瓶
血液 RNA 纯化溶液 B15 mL15 mL 棕玻瓶
血液 RNA 纯化溶液 C50 mL60 mL 本色瓶
离心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
RNA 洗脱液10 mL10 mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂
氯仿。
使用方法:
1.将 0.2-1.5 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 1.5 mL 塑料离心管中。
2.14000 g 室温离心 3 分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于 0.2 mL, 则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。
3.将 1 mL 血液 RNA 纯化溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪充分吹打沉淀使细胞裂解。
4.将 0.3 mL 的血液 RNA 纯化溶液 B 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5.和 0.2 mL 自备氯仿加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
6.14000 g 室温离心 3 分钟,将上清液(为无色或浅红色,约 0.5-0.9 mL)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 0.7 mL,否则下一步不能加入等体积的血液 RNA 纯化溶液 C。为防止污染,最好留 100
uL 左右的上清液不取。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有
DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
7.加入等体积的血液RNA 纯化溶液 C,充分颠倒混匀。
8.分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 14000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
9.加 0.7 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
10.如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。注意:增加此步可以进一步提高 RNA 的纯度。
11.室温 14000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
12.将离心吸附柱转移到一个自备的 RNase-free 的收集管中,加入 50 uL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
13.14000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14.电泳检测 RNA 完整性:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子
(BioTechniques,28:414,2000)。
15.在 NanoDrop 上测浓度和纯度。
16.立即用于后续实验,或放-80℃保存。
选择我们的血液 RNA 纯化试剂盒(过柱法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!