产品简介：

本产品利用 Taq DNA polymerase 的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有 dATP 存在的情况下，在平末端的 DNA 片段加上一个 dA 尾巴，使平末端片段也能被 T 载体克隆。

产品特点：

1.简单，2×加 A MasterMix 中含有所需要的所有成分，不需要单独准备。

2.适用于任何平末端的 DNA 片段，包括 Pfu DNA polymerase 等酶合成的 DNA 片段。

3.产物可以直接用于与 T 载体的连接。

4.本产品足够 50 次加 A 反应。

5.DNA 片段加 A 试剂盒只能用于科研。

产品参数：

成份规格包装

2×加 A MasterMix1 mL2mL 本色管

使用手册1 份无

运输及保存

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂

PCR 片段、超纯水

使用方法：

一：反应前纯化处理：

用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶扩增得到的 DNA 片段，必须经过彻-底的去除残留的酶的处理过程（如酚/氯仿抽提或 Proteinase K 处理），否则它们将在加 A 反应时，切除掉加上的 A 尾巴，干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE 中，终浓度以 0.1 ug/uL 为宜。

二：加 A 反应

在干净的 0.5 mL 或 1.5 mL 离心管中，分别加入回收的 DNA 片段(0.2-2 ug)，25 uL 2×加 A MasterMix，补水到 50 uL 后 72℃保温 2 小时

三：反应后处理

加 A 反应后，Taq DNA polymerase 将与 DNA 末端紧密结合，所以必须酚/氯仿抽提去除。如果使用 Proteinase K 处理后再用酚/氯仿抽提效果会更好。得到的 DNA 溶于适量水和 TE 中后即可用于 T 载体的连接反应。

选择我们的DNA 片段加 A 试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！