土壤蔗糖酶试剂盒 返回列表页

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/24 样

土壤蔗糖酶试剂盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。

测定原理：

S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 510nm有特征光吸收，在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与S-SC 活性成正比。

试剂组成和配制：

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 40ml 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂 4℃保存；

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

样品处理：

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

测定步骤和加样表：

充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液；

充分混匀，95℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀，蒸馏水稀释 10 倍后（可以吸取 100μl，加入 900μl 蒸馏水稀释；如果吸光度大于 4，可以适当加大稀释倍数），510nm 处蒸馏水调零，读吸光值A。计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-SC 活性计算：

标准条件下测定的回归方程为y = 4.9x -0.062；x 为标准品浓度（mg/ml），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。

S-SC 活力(mg/d /g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062)

10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：1.015ml；W：样本质量，0.1g。

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