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NobleRyder F6628 钙荧光探针 Fluo 3-AM

产品货号：F6628

产品名称：钙荧光探针 Fluo 3-AM

英文名称：Fluo 3-AM

产品规格：100ug/1mg

钙荧光探针 Fluo 3-AM 细胞功能产品简介：

别名：钙荧光探针/钙离子探针

分子式：C51H50Cl2N2O23

分子量：1129.85

纯度/级别：≥90%(HPLC)

外观(性状)：红色粉末（本品为冻干粉形式，可能会粘附在管壁上，是正常现象，可放心使用）

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准。

NobleRyder F6628 钙荧光探针 Fluo 3-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3，AM 进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。Fluo-3，AM 的一个重要作用是其在高通量药物筛选中的应用。

操作步骤（仅供参考）：

1、用DMSO溶解配制1-5mM的Fluo-3，AM母液，向 Fluo-3,AM/DMSO 溶液中加入等体积的 20%的 Pluronic F127 溶液，Pluronic F127 可以防止 Fluo-3,AM 在 HBSS 中聚合并能够帮助其进入细胞。（注意：不建议在 PluronicF127 中长期保存 Fluo-3,AM 溶液。PluronicF127 的量可以适当调整，PluronicF127 和 Fluo-3,AM 一定要确保wan全溶解后才可使用。）

2、用HBSS溶液稀释1-5mM的Fluo-3,AM母液，配制成1-5μM的Fluo-3,AM工作液（此浓度仅供参考，请根据具体实验要求自行调整）。

3、取出预培养细胞，去除培养基，用HBSS溶液洗涤细胞三次。

4、加入Fluo-3，AM工作液，溶液量以覆盖细胞为准。

5、37℃细胞培养箱孵育约10-60min。

6、去除Fluo-3，AM工作液，用HEPESbuffersaline溶液洗涤细胞三次。

7、加入含1%胎牛血清的HBSS溶液，使其覆盖细胞，37℃细胞培养箱孵育约20-30min，确保AM体在细胞内的wan全去酯化作用。

8、用激光共聚焦或荧光显微镜检测细胞，激发波长480-500nm，发射波长525-530nm，如需荧光酶标仪或流式检测需用 HEPESbuffersaline 使细胞重悬浮，制成 1×105cells/mL 的溶液。

注意事项：

1、如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解AM体，从而降低Fluo-3，AM进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，所以加工作液之前，应尽量去除培养基残留。

2、关于细胞孵育时间，建议先孵育30min，看荧光效果。如果细胞死亡较多，应缩短时间；如果荧光强度太弱，适当延长时间。

钙荧光探针 Fluo 3-AM 细胞功能产品订购信息：

F6628 钙荧光探针 Fluo 3-AM  100ug/1mg