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人单核细胞诱导DC培养基

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更新时间:2022-07-18 16:06:53浏览次数:486

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产品简介

供货周期 现货 规格 1 kit
货号 CS-20003-100 应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药,综合
人单核细胞诱导DC培养基是为在体外培养和诱导人单核细胞向成熟CD1c+cDC2树突状细胞(DC)亚群分化发育而专门设计的一款含血清培养基套装。该培养试剂盒可在7天内诱导人cDC2(CD11c+ HLA-DR+ CD1c+CD14-)亚群产生,是研究人cDC2分化发育和功能、以及产生人DC疫苗的重要培养系统。

详细介绍

产品介绍

人单核细胞诱导DC培养基是为在体外培养和诱导人单核细胞向成熟CD1c+cDC2树突状细胞(DC)亚群分化发育而专门设计的一款含血清培养基套装。该培养试剂盒可在7天内诱导人cDC2(CD11c+ HLA-DR+ CD1c+CD14-)亚群产生,是研究人cDC2分化发育和功能、以及产生人DC疫苗的重要培养系统。人单核细胞诱导DC培养基


产品特点

针对人单核细胞向成熟CD1c+cDC2树突状细胞(DC)亚群分化发育而设计,


产品成分

产品名称

Catlog#

规格

储存条件

人单核细胞诱导树突状细胞培养试剂盒

CS-20003-100

1 kit

人单核细胞诱导树突状细胞基础培养基

CS-20003-B

100ml

4℃

人单核细胞诱导树突状细胞分化补充因子

CS-20003-DES

0.5ml

-20℃

人单核细胞诱导树突状细胞成熟补充因子

CS-20003-MTS

0.5ml

-20℃

预筛选树突状细胞专用胎牛血清

CS-DCF-1010ml-20℃


其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂

人CD14+单核细胞磁珠分选试剂


*培养基配制

(在无菌生物安全柜中,开展以下操作)

1.在4度冰箱解冻补充因子和胎牛血清,混匀后使用。

注:解冻后的补充因子和血清可放置于4 oC冰箱,在1个月内使用;或者分装至合适体积后,保存于-20℃冰箱,不可反复冻融!

2.分化培养基配制:将1体积的分化补充因子和10体积的血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到人cDC2树突状细胞分化培养基。如取100ul补充因子和1ml血清加入至8.9ml基础培养基,以此类推。

成熟培养基配制:将1体积的成熟补充因子和10体积的血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到人cDC2树突状细胞成熟培养基。

注:配好的*培养基请于4℃保存,且于1个月内使用完毕。


使用说明

(请详细阅读使用说明后再开始相关实验)

1.使用磁珠分选人外周血单个核细胞中单核细胞(参考所使用试剂盒的说明书),计数。

注:健康供体每1ml外周血中约含有1-3*10^5单核细胞。

2.D0:使用分化培养基重悬单核细胞,调整细胞密度至1*10^6/ml,按照如下表格所示将细胞铺于培养板:

培养板

*培养基体积

单核细胞数/孔

24孔板

1.0ml

1.0*10^6

6孔板

4.0ml

4.0*10^6

3.将培养板置于细胞培养箱,37℃,5%CO2,静置培养。

4.D3:半量换液。小心贴培养板侧壁用枪尖吸走1/2体积旧培养基,补充加入新鲜分化培养基至初始培养体积(步骤2表格)。

注:*培养基请恢复至室温后使用,减少对细胞的刺激。

5.D5:诱导成熟。小心贴培养板侧壁用枪尖吸走1/2体积旧培养基,补充加入新鲜成熟培养基至初始培养体积(步骤2表格)。

6.D7:轻轻吹打细胞,收集悬浮细胞,即为分化成熟的人CD1c+cDC2,可进行后续操作和分析。

注:如需研究特定刺激对DC的影响,可提前加入相应刺激,待D7收集细胞进行分析。


数据展示

图:人单核细胞诱导树突状细胞培养鉴定。磁珠分选的人单核细胞按照上述说明培养,至第6天时,加入100ng/ml LPS刺激,第7天收集悬浮细胞进行流式染色分析。


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