RIPA裂解液 蛋白类 返回列表页

RIPA裂解液

产品货号：T16003

产品规格：100ml

保存条件：运输4℃，长期保存-20℃

产品简介：

    RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白 样品可以用于常规的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。本产品RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS等。

操作步骤：

• 对于培养细胞样品：

• 对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有  干扰，可以不洗)。按照每10⁷细胞加入200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
• 对于悬浮细胞，离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照每10⁷细胞加入200微升裂解液  的比例加入裂解液。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，可适量添加裂解液。
• 充分裂解后，10000-14000rpm离心5-10分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

• 对于组织样品：

• 把组织剪切成细小的碎片。
• 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添 加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
• 用玻璃匀浆器冰上匀浆，直至充分裂解。
• 充分裂解后，10000-14000rpm离心5-10分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
• 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。

注意事项 ：

• 裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
• 用户使用前可根据需要加入蛋白酶抑制剂如PMSF或者根据需要再加入leupeptin，aprotinin等其它抑制剂。
• 裂解液中SDS 4℃保存易沉淀析出，使用前应该37℃-60℃水浴重新溶解*后回复到室温使用。
• 裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

诚招全国地区代理经销商！！！

尚宝主营产品：

试剂盒

· 细胞活力/毒性检测试剂盒

· 蛋白提取相关试剂盒

· 蛋白定量/浓度测定试剂盒

· 核酸纯化/提取相关试剂盒

· 核酸检测试剂盒

· 染色试剂盒

· 生化试剂盒检测试剂盒

染色类

染色液     固定液    脱钙液     染色辅助试剂     指示剂     

荧光染料

通用Buffer      常规溶液  

核酸类       蛋白与免疫   

生化试剂    病理常用染色试剂   

细胞类      细胞培养基 

标准品      ELISA 试剂盒   

DNA Marker   耗材

上海尚宝生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售、服务于一体的高科技生物企业。公司总部位于上海、在全国30多个省市设有分公司和代理机构。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及*仓储和物流系统，为各大院校、科研单位、医院、生产厂商等单位提供优质的服务，大程度地满足用户的需要。 
公司拥有一批专业的博士、硕士研发人员，专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，尚宝生物公司提供各种常规生化试剂，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，尚宝生物谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买尚宝生物产品的用户都能够得到专业的咨询和售后服务。

尚宝生物公司坚持与国际接轨，注重和*企业的合作与交流，目前已经和Sigma、Thermo、Axygen、Merck、Roche、Amresco、Millipore、Whatman、Corning、Fluka、Serva等较有名企业结成紧密的合作伙伴关系，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多品牌合作，为广大生物科研工作者提供优质、专业的服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。尚宝生物公司期待与各同行精诚合作，为广大科研工作者提供更加优质的产品和服务。