杆粒提取试剂盒（核酸提取纯化相关） 返回列表页

产品货号：10123

产品规格：100 次/200 次

产品简介：

杆粒提取试剂盒（核酸提取纯化相关）适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。

包装清单：

自备试剂：50 次自备 36ml 无水乙醇/100 次自备 72ml 无水乙醇/100 次自备 144ml 无水乙醇。

操作步骤：

1. 将估计 DNA 反应液的体积，加入 5 倍体积的 Buffer PG，充分混匀（无需去除石蜡油或矿物油）。 注意：如 DNA 反应体系为 50µl(不包括石蜡油体积)，则加入 250 µl Buffer PG。

2. 柱平衡：向已装入收集管（Collection Tubes）中的吸附柱（Spin Columns）中加入 200μl Buffer

3. PS，12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

4. 将步骤 3 或 4 所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温放置 2 分钟，12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收 集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收 集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

注意：如果纯化的 DNA 用于盐敏感的实验（例如平末端连接或直接测序），建议加入 Buffer PW 静置 2-5 分钟再离心。

6. 重复步骤 4。

7. 12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中的废液。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR 等）。 将吸附柱放到一个新的 1.5 ml 离心管（自备）中，向吸附膜中间位置悬空滴加 50μlBuffer EB，室温放置 2 分钟。 12000 rpm 离心 1 分钟，收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。

注意事项：

1. 使用前应按照试剂瓶标签的说明在 Buffer PW 中加入无水乙醇。

2. 所有离心步骤均可室温下进行。