400-611-0007
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| 供货周期 | 现货 | 规格 | 50次/100次/200次 |
|---|---|---|---|
| 货号 | 26111 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
| 主要用途 | 可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作 |
细胞核蛋白提取试剂盒 200 次
产品货号：26111
产品简介：
细胞核蛋白提取试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞的细胞核和细胞浆蛋白，所提取蛋白保持生物学活性。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高，有效避免核/浆蛋白的交叉污染，可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
产品内容：
| 产品信息 | 包装 | 储存条件 |
|---|---|---|
| 细胞核抽提试剂 A | 100ml | 4℃ |
| 细胞核抽提试剂 B | 100ml | 4℃ |
| 细胞核抽提试剂 C | 7ml | 室温 |
操作步骤：
1.请在蛋白抽提前取出抽提试剂 A、B 和 C 进行预冷
2.收集细胞，计数。离心去上清。
3.1×10 7细胞中加入 0.5ml 细胞核抽提试剂 A，涡旋 5 秒以充分混匀，冰上孵育 10 分钟。
注意：
各种细胞的特性不同，需要根据不同细胞的特性调整细胞核抽提试剂 A 的用量，如果蛋白浓度 小，按比例减少细胞核抽提试剂 A 及后续细胞核抽提试剂 B、C 的用量。
4.4℃ 3000 rpm 离心 10min，吸弃上清。
5.加入 374μL 细胞核抽提试剂 B，再加入 26μL 细胞核抽提试剂 C
6.将步骤 5 中溶液加入玻璃匀浆管中，用玻璃匀浆管冰上反复匀浆 20 次，冰上孵育 30min。 7.4℃ 12,000 rpm 离心 20 分钟，收集上清（尽量收集干净上清液）至新的离心管中，-20℃ 8.保存（此提取液为胞核蛋白）。
注意事项：
1.如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2.所有样品操作请置于冰上进行。
3.可以采用更高的速度来离心。
4.根据实验需求，细胞核抽提试剂 A& B 使用前加入合适的蛋白酶抑制剂。
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