黄曲霉毒素B1检测卡使用说明书

　　一、产品简介

　　黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）是已知致癌性很强的化学物质之一，主要污染粮油及其制品（如花生、玉米、小麦、大米、茶叶、食用油等）。黄曲霉毒素B1检测卡采用胶体金免疫层析技术，通过特异性抗体抗原反应快速定性检测样本中的AFB1残留，适用于企业自检及监管机构初筛。

　　二、检测范围与灵敏度

　　适用样本：谷物、饲料、食用油、酱油、醋、发酵酒等。

　　灵敏度：

　　谷物/饲料类：3-10ppb（μg/kg）；

　　油脂类：5ppb（μg/kg）。

　　检测下限：符合中国及欧盟标准（如玉米/花生中AFB1允许量≤20μg/kg，欧盟进口花生原料≤8μg/kg）。

　　三、检测原理

　　样本中的AFB1与胶体金标记的特异性抗体结合，竞争性抑制抗体与检测卡上AFB1-BSA偶联物的结合。若样本中AFB1含量≥检测限，检测线（T线）不显色，结果为阳性；若<检测限，T线显色，结果为阴性。

　　四、操作步骤

　　1.样本前处理

　　谷物/饲料：

　　取代表性样品5g以上，粉碎过20目筛，称取0.5-2.0g至离心管。

　　加入4mL纯净水+4mL乙酸乙酯（或70%甲醇水），振荡5分钟，4000rpm离心1分钟。

　　取上清液2mL至蒸发皿，吹干后用0.3-2mL稀释液复溶，混匀备用。

　　食用油：

　　取0.5-2.0g油样，加入8mL正己烷+4mL纯净水，振荡3分钟，吸去上层正己烷。

　　加入4mL乙酸乙酯，振荡5分钟，离心后取2mL上清液吹干，用稀释液复溶。

　　液体样本（酱油、醋等）：

　　取25g样品，加入20mL振摇3分钟，静置分层后取下层液体。

　　过滤后吹干，用稀释液溶解残留物。

　　2.点卡检测

　　从铝箔袋中取出检测卡，平放于桌面，1小时内使用。

　　用滴管吸取处理后的样本液，缓慢滴加3滴（约80μL）至加样孔（S孔）。

　　室温静置8-10分钟，读取结果（超过12分钟判读无效）。

　　五、结果判读

　　阴性（-）：T线（检测线）与C线（对照线）均显色，且T线颜色≥C线。

　　阳性（+）：仅C线显色，T线不显色或颜色很浅。

　　无效：C线未显色，可能因操作不当或检测卡失效，需重新检测。

　　六、注意事项

　　样本处理：

　　避免交叉污染，使用一次性吸头；油脂样本需去除上层油层后取下层液体。

　　若提取液偏酸/碱，需调节pH至中性后再检测。

　　操作规范：

　　检测卡避免阳光直射或电风扇直吹；加样时滴管垂直悬空，防止气泡产生。

　　读取结果时，检测卡保持水平，勿移动或触摸中央膜面。

　　安全与储存：

　　黄曲霉毒素B1为剧毒物质，操作时佩戴手套，废弃物按危险品处理。

　　检测卡需在4-30℃干燥避光保存，有效期12-18个月（具体见包装）。

　　局限性：

　　本产品为初筛工具，阳性结果需用HPLC或LC-MS/MS进一步确认。

　　仅适用于清亮、无混浊颗粒的样本溶液，否则可能阻塞膜孔导致显色异常。

　　七、配置清单

　　标配：检测卡、滴管、干燥剂、说明书。

　　需自备：天平（感量0.1g）、离心机、粉碎机、蒸发皿、移液器、乙酸乙酯、正己烷等。

　　八、示例场景

　　企业自检：某花生油厂每批次取2g油样，按前处理步骤操作后，15分钟内完成检测，阳性样本立即隔离复检。

　　监管抽检：市场监管部门使用本卡快速筛查市售大米，发现T线不显色时，封存样品并送实验室定量分析。