货号: | CM-6047G |
供应商: | 上海淳麦 |
数量: | 1000只 |
英文名: | XL1-BlueChemically Competent Cell |
保质期: | 1年 |
保存条件: | 零下80度 |
规格: | 20*100ul |
Shuffle T7-K12 感受态细胞产品介绍:
Shuffle T7-K12菌株来源于大肠杆菌K12菌株,适用于T7启动子启动的蛋白表达。细胞内组成型表达的二硫键异构酶DsbC不仅有利于表达蛋白形成正确的二硫键,并具有分子伴侣的功能,帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域,组成型表达的lac 阻遏蛋白能降低基因的背景表达,有利于毒性蛋白的表达,没有λ前噬菌体序列,具有抗T1噬菌体感染特点。Shuffle T7-K12感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于106 cfu/μg DNA。
Shuffle T7-K12 感受态细胞基因型: F′lac, pro, lacIQ / r (ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 r(phoA) PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) rtrxB rpsL150(StrR) rgor r (malF)3
菌株抗性:对氨苄青霉素,氯霉素,卡那霉素和四环素敏感,对链霉素和壮观霉素抗性。
储存条件:-70℃保存,避免反复冻融。
Shuffle T7-K12 感受态细胞操作说明:
- 取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
- 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT 或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。