ATH超敏化学发光液

Femto-Sensitive ECL Solution是一种基于Luminol的高灵敏性、非放射性化学发光底物，用于检测免疫印迹中固定在膜上的辣根过氧化物酶（HRP），可检测飞克级别的抗原。持续发光时间长达6个小时，可反复曝光于X射线胶片或化学发光成像系统，以获得最佳的结果或剥离的免疫检测试剂和再探测。

 Femto-Sensitive ECL Solution可用于Western Blot，Northern Blot, Southern Blot, Dot Blot等实验中检测HRP标记的探针或者抗体。

Preparation使用说明：

1. 常规电泳、转膜、HRP标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。核酸杂交膜用HRP标记探针杂交，洗膜。

2. 洗涤膜上的 HRP 标记二抗时，新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液Luminol/Enhancer solution 和 Stable Peroxide Buffer 1:1混合，放置使之升到室温否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3. 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜*干燥。将膜*浸入并与发光工作液(0.125ml发光工作液/cm膜)充分接触。室温孵育 3-5分钟，准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。

4. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。

5. 在 X 光胶片暗盒内面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将杂交膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来*包裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内，最好蛋白带面向上。

6. 在黑暗中放入X光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟显影冲洗。