LP-UV－NIR260紫外可见近红外分光光度计

LP-UV－NIR260紫外可见近红外分光光度计
1、基本工作原理
1）吸收的本质：分光光度法是利用物质对不同波长光的选择吸收特性而建立起 来的分析方法。通常利用棱镜或光栅分光来取得单色光，使单色光连续地依次通 过溶液，并测得该溶液对每一波长的吸收，得到吸收光谱曲线。
吸收光谱来源于物质对光的选择吸收，这是物质的宏观现象，而吸收的本质 是分子内部运动和光相互作用的结果。当物质的分子吸收一定能量或波长的光谱 后，透过的光谱中有些波长被吸收就形成了吸收光谱。吸收的能量愈小，则相应
的光的波长，吸收峰出现在较长波段。当吸收在红外区时形成红外吸收光谱，如 果吸收能量愈大，则相应的波长愈短，吸收峰出现在较短波段，当吸收在紫外区 产生紫外吸收光谱。
2）吸收定律—朗伯比耳定律：当一束平行单色光通过均匀的溶液时，其吸光度
与溶液的浓度和厚度的乘积成正比。
其数字表达式：A=KCL=LogI0/I=-LogT
吸收定律数字表达式成立的前提：①，入射光为单色光，②，吸收过程中各
物质无相互作用，各物质吸光度具有加和性，③，光与物质的作用*于吸收过
程，没有荧光散射和光化学现象，④，吸收物是一种均匀分布的连续体系，
3）影响分光光度法的原因：
a，辐射与物质的非吸收作用引起的误差，
b，荧光与光化学反应的影响，一般说来，荧光对分光光度测量产生的误差
可以忽略，多数情况下显色体系的荧光效率很小，而且荧光发射是各向同性，只
有一小部分沿着透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低，产生负偏离。荧光
对吸收测量的影响*程度上决定于仪器的吸收池和检测器光学设计， c，反射和散射，吸收定律只适用于均匀介质的吸收体系，浑浊溶液因散射 使实测吸光度增加，导致偏离比耳定律，
d，仪器的非理想性引起的误差，
e，复色光对比耳定律的偏离，大多数光度计只能获得接近于单色光的狭窄 的光通带，实际上仍是有复色光性质，可导致偏离比耳定律。偏离的大小取决于 二单色光的摩尔吸光系数差△ε，|△ε|很小时，可近似认为是单色光，在低浓
度时，工作曲线仍为直线，但浓度较大时，随浓度增大，A-C曲线弯曲愈严重，
故比耳定律只适用于稀溶液，
f 杂散光，杂散光是指进入检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的不需要
的其它波长组分。其主要来源于分光光度计色散元件棱镜或光栅、反射镜、透镜
表面的散射，单色器内壁灰尘及其它元件伤痕的反射和漫射等，杂散光可引起严
重的测量误差。在仪器能量处于小的波长处，杂散光通常处于大值（如氘灯 220nm,钨灯 340nm），
g，狭缝宽度，狭缝宽度不仅影响光谱的纯度，也影响吸光度值。在定量分
析时，为了得到足够的测量信号，应采用较大的狭缝，在定性分析时则采用较小 的狭缝，当出射狭缝和入射狭缝的宽度相等时，狭缝宽度引起的误差小

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