紫外可见近红外分光光度计定量测定

紫外可见近红外分光光度计定量测定 定量测定
3.1 定量测定简介
定量测定是用待测样品的测量值与标准样品的测量值进行比对，后计算出待测样品的
浓度值的一种测定方法。定量测定可分为单波长定量、双波长定量、三波长定量、一次微分
定量、二次微分定量、三次微分定量等诸多的测量方法。本系统暂支持单波长，双波长两种
测量方法。
3.2 定量测定参数设置
激活定量测定窗口，选择【测量】菜单下的【参数设置】子菜单，即可打开定量测定设
置窗口。
窗口共有五个选项卡，分别是：【测量】、【校正曲线】、【仪器】。其中，仪器内容与仪器
性能和附件设置窗口的内容**。
测量选项卡
测量选项卡主要提供定量测定的方法设置、波长设置和重复测量设置等。您可以选择不
同的测量方法来完成不同的定量要求。同时还可以设置样品编号和测量重复次数。
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 测量方法
设置定量测定的测量方法。可选的测量方法有：【单波长法】、【双波长法】。您可以根据
不同的测试要求对方法进行选择。如果您选择了单波长法，则需要在【主波长】编辑框中输
入测定波长。如果您选择了双波长，则需要在【基线波长 1】编辑框中输入基线波长。有关
定量测定方法的详细介绍，请参阅 附录 A 定量测定的应用方法。
 样品编号
设置标准样品和未知样品的标识名称及编号。
 其他设置
在其他设置中，您可以设置对样品进行重复测量。重复测量是对一个样品进行多次测量，
然后取多次测量结果的平均值进行含量计算。因此，如果您选择了【重复测量】选项，还需
要在【重复次数】编辑框中输入需要重复测量的次数，这样才能够达到重复测量的目的。重
复测量可使测量的数据更为准确，但测量所花费的时间要比正常测量梢长一些。
校正曲线选项卡
校正曲线选项卡允许您对校正曲线的参数进行设置。可设置的参数包括：【曲线方程】、
【方程次数】、【浓度单位】、【校正方法】等。
 曲线方程
设置校正曲线所使用的方程：C=f(Abs),是以吸光度做为变化量来求解浓度值。
方程次数
方程次数表示校正曲线所使用的方程的次数，也可以称为阶数。就是我们常说的“一元
二次方程”、“一元三次方程”中的“二次”和“三次”，主要是指方程中变化量的次数。

可选的方程次数有：【一次】、【二次】、【三次】和【四次】。其中，一次方程也可以称“线性
方程”，其他的则称为“非线性方程”。由于紫外可见分光光度计的测光准确度和重复性都比
较好，在允许的吸光度范围内其测量的数据与浓度值基本程线性变化，因此，线性方程应用
得比较广泛。您可以根据实际情况来对曲线方程进行选择。
 浓度单位
设置样品系列的浓度单位。默认的浓度单位有：【ηg/μl】、【ηg/ml】、【μg/μl】、【μg/ml】、
【mg/l】、【ppb】、【ppm】和【mol/l】。如果没有您所需要的浓度单位，您还可以手工输入一
个浓度单位。
 校正方法
校正方法共分为两种，分别是：【浓度法】和【系数法】。浓度法要求您输入标准溶液的
浓度，然后对标准溶液进行吸光度测量，得到测量数值后，与输入的浓度进行曲线拟和并计
算出方程的系数与相关性。而系数法则要求您直接输入方程的各项系数，不用进行标准样品
的测量。例如，如果您将方程次数设置为二次，同时选择了系数法，则需要输入三个方程系
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数，即：K0、K1、K2。K0 表示常数项，K1 表示一次项系数，K2 表示二次项系数。
3.3 定量测定
定量测定窗口共分为四个部分，即：【标准样品表格】、【未知样品表格】、【校正曲线】
和【参数列表】。
校正曲线
标准样品表格
参数列表
样品表格

测量表格
标准样品表格负责显示标准样品的测量结果。一般情况下，表格共有八列，分别是：【序
号】、【编号】、【类型】、【浓度】、【吸光度】、【测定波长的吸光度】、【标准偏差】和【相对标
准偏差】。如果您使用双波长法或三波长法，表格中还将显示其他测量波长的数值。
【序号】：表示样品数量。
【编号】：为样品进行名称编号，可编辑。
【类型】：对于标准样品，类型为“标准样品“，对于未知样品，类型为“未知样
品”。
【浓度】：样品的浓度值。
【吸光度】：样品的终吸光度值。
表 0-1 定量测定计算方法
单波长法：
Abs =        A
1
双波长法：        Abs = A -
1 A
2
双波长系数法： Abs = A - A • K
1 2
表中，【Abs】表示终的吸光值，【A1】主波长的吸光值。【A2】基线波长 1 的吸
光值。【A3】基线波长 2 的吸光值。【K】表示双波长系数法中的系数。
【测定波长的吸光度】：样品在相应波长点的吸光度值。
 【标准偏差】：重复测量的标准偏差值。
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【相对标准偏差】：重复测量的相对标准偏差值。如果未设置重复测量，标准偏差
和相对标准偏差均为零。
进行标准样品测量和未知样品测量时，可点击相应的测量表格，表格上方将显示“（使
用中）”的字样，表示此表格已经激活，所有的测量均在此表格中操作。
校正曲线
校正曲线负责显示当前的校正曲线图形。如果您未进行标准样品测量，则无图形显示。
参数列表
参数列表显示当前的定量测量参数。包括曲线方程、系数等信息。
测量
如果您在定量测定参数设置中，将校正方法设置为浓度法，则在测量之前，需要在定量
测定表格中输入标准样品的浓度值，然后才可以测量。直接点击测量按钮，此时系统会提示
您输入一个浓度值。
输入浓度值后，点击【确定】按钮，系统会自动添加一个标准样品，将浓度值设置为您
刚才设置的数值，并立即测量此样品。
如果您在定量测定参数设置中，将校正方法设置为系数法，则不需要对标准样品进行测
量。直接测量未知样品即可。
3.4 保存测量文件
定量测定的数据同样可以保存的磁盘。选择【文件】菜单下的【保存】子菜单,即可打
开文件保存窗口，在窗口中输入要保存的文件名，点击【保存】按钮即可。

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