转氢酶2紫外分光光度法测试盒 返回列表页

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商品介绍：
TH位于线粒体的内膜上，又称为线粒体复合体六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化，调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

测定原理：

NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+还原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，测定375nm光吸收的增加速率，来计算TH-2活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
测定操作表：

剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
酶活性计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反总÷（V样×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按样本质量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/g 鲜重）= ×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按细胞数量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量）÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε：氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应中样本体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反总÷（V样×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按样本质量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/g 鲜重）= ×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按细胞数量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体     抗体

ELAVL1抗体     单克隆抗体

脑啡肽抗体     氯离子通道调节蛋白1A抗体

细胞外信号调节激酶4抗体     氯离子通道蛋白6抗体

内皮素3抗体     氯离子通道蛋白5抗体
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转氢酶2紫外分光光度法测试盒放射性根瘤菌   爪哇根霉

肠膜明串珠菌   印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

球孢链霉菌   虫草

发根土壤杆菌（发根植物单胞菌）   美味侧耳、紫孢侧耳

淡紫色拟青霉   黑球漆斑菌