葡萄糖6磷酸酶（G6P)微量法测试盒 返回列表页

商品介绍：
葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase，G6Pase，EC 3.1.3.9）广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。

测定原理：

G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖，变旋酶和葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NAD+还原生成NADH，在340nm下测定NADH生成速率，即可反映G6P活性。

需自备的仪器和用品：

分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
测定操作表：

酶活性计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反总÷（V样×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按样本质量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/g 鲜重）= ×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按细胞数量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量）÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε：氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应中样本体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反总÷（V样×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按样本质量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性（nmol/min/g 鲜重）= ×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按细胞数量计算：
酶活性定义：在pH7.2，温度为37℃条件下，每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
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杀菌/通透性增加蛋白样2抗体     乙型肝炎e抗原单克隆（包被）抗体

嗜乳脂蛋白样3抗体     乙酰基转移酶EID1抗体

杀菌/通透性增加蛋白样3抗体     乙酰基转移酶10抗体
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