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cDNA *链合成试剂盒10 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
3. 电泳检测是否得到预计长度的 PCR 产物。
cDNA *链合成试剂盒10 次*产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
产品介绍:
规格及成分:
大鼠睾酮(T)ELISA Kit
大鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA Kit
大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA Kit
大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA Kit
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA Kit
大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA Kit
大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA Kit
槐凝集素(SJA)ELISA Kit
鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit
人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA Kit
人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA Kit
人α干扰素(IFN-α)ELISA Kit
人白介素1α(IL-1α)ELISA Kit
人补体3裂解产物(C3SP)ELISA KitMCF7/腺细胞株国产
嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
糙皮侧耳 Pleurotus ostreatus
小鼠肺微血管内皮细胞*培养基100mL
大鼠肺微血管内皮细胞*培养基100mL
无花果曲霉 Aspergillus ficuum
厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydospora
Hs68(人男性正常龟细胞)5×106cells/瓶×2
粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe
香菇 Lentinula edodes
人脂肪细胞*培养基100mL
人小肠平滑肌细胞*培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
球孢白僵菌 Beauveria bassiana
GES-1全细胞裂解液100ug100ug
人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA Kit
人多效生长因子(PTN)ELISA Kit
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