《乳中乳过氧化物酶活性的测定 比色法》团体标准发布

2022年4月22日，《乳中乳过氧化物酶活性的测定 . 比色法》团体标准由中国食品科学技术学会发布，并正式实施。该标准由光明乳业股份有限公司、上海市农产品质量安全中心、北京中检葆泰生物技术有限公司和内蒙古伊利实业集团股份有限公司共同起草。

标准采用比色法检测乳中乳过氧化物酶的活性，乳中乳过氧化物酶与底物3,3' ,5,5'-四甲基联苯胺(TMB)发生氧化反应,生成蓝色产物,加酸终止反应后溶液变成黄色。在450 nm下测定溶液的吸光度,乳过氧化物酶的活性与吸光度成正比,通过标准曲线定量计算其酶活性。

试剂和材料

乳过氧化物酶活性试剂，或Evergreen乳过氧化物酶活性试剂盒。注：Evergreen乳过氧化物酶活性试剂盒由北京中检葆泰生物技术有限公司提供。

样品提取

吸取10.00 mL样品，置于15 mL离心管中，加入0.6 mL样品处理溶液，涡旋混匀，静置5~10 min，3000g离心10 min，用滤纸过滤，收集滤液待测。

测定

取出所需数量的微孔板，并做好标记。吸取50 μL滤液和系列标准溶液分别加至微孔中，加入50 μL乳过氧化物酶底物溶液（TMB），吹打混匀，室温避光孵育15 min。孵育结束后，向每个微孔中加入100μL终止液，吹打混匀后，立即用酶标仪在450nm下读取并记录每个微孔的 OD值。