上海桥星贸易有限公司
主营产品: 进口透析袋,密理博ECL发光液,B27无血清培养基,Gibco胶原酶 |
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参考价 | ¥ 480 |
订货量 | 1 |
更新时间:2024-01-07 20:12:37浏览次数:1257
联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!
RNA/DNA病毒基因组提取试剂盒
试剂盒组成 | 50T | 100T | 保存温度 |
蛋白酶K(10mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
结合液 | 25ml | 50ml | RT |
漂洗液(RNase free) | 15ml | 15ml×2 | 2-8℃ |
玻璃奶 | 1.25ml | 2.5ml | 2-8℃ |
洗脱缓冲液(RNase free) | 10ml | 10ml | 2-8℃ |
原理简介
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因组,也可用于DNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳,放出RNA/DNA,用玻璃奶吸附达到纯化目的。
使用本试剂盒提取的RNA/DNA可用于各种常规操作,包括RT-PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
注意事项
1.一般病毒含量过低,zui后提取的基因组RNA/DNA电泳无法检测到,但RT-PCR/PCR等其他实验还会有结果。
2.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。
3. 所有离心步骤用低温离心机在4℃条件下离心,如果实验室没有低温离心机,也可以使用常温离心机,但所提得的RNA可能会降解严重些。
操作步骤
准备工作:使用前请先开启一瓶新的无水乙醇,倒入漂洗液中,倒满至离瓶口约0.5-1ml,盖上瓶口,摇匀。
1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm离心5min,尽量取上清使用,弃去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,65℃消化10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 向管中加入500ul结合液,充分混匀。
4.玻璃奶摇匀。加入25ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟,加入30-50ul洗脱缓冲液混匀溶解,静置5分钟。离心,取上清为所提RNA。
聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 ¥ 280
4×甲醛变性胶上样缓冲液 ¥ 80
通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV) ¥ 1300
PCR试剂盒(教学用) ¥ 240