微孔板:已预包被 ROS 特异性抗体,为抗原抗体反应提供固相载体。
标准品:一系列已知浓度的 ROS 标准溶液,用于绘制标准曲线,以便对样本中的 ROS 进行定量分析。
酶结合物:酶标记的二抗,能够与结合了 ROS 的一抗结合,催化底物显色。
底物溶液:在酶的作用下发生化学反应,产生可检测的颜色变化。
洗涤缓冲液:用于去除未结合的物质,减少非特异性信号干扰。
终止液:用于终止酶促反应,使反应体系的颜色稳定,便于准确测量吸光度。
样本准备:根据样本类型(如细胞裂解液、组织匀浆、血清等)进行适当处理,确保样本中的 ROS 处于可检测状态。
加样:将标准品和处理好的样本加入到预包被的微孔板中,温育一段时间,使 ROS 与抗体充分结合。
洗涤:用洗涤缓冲液冲洗微孔板,去除未结合的物质。
加酶结合物:加入酶标记的二抗,再次温育,使酶结合物与已结合的 ROS - 一抗复合物结合。
洗涤:重复洗涤步骤,去除未结合的酶结合物。
加底物显色:加入底物溶液,酶催化底物反应,产生颜色变化。
终止反应:加入终止液,终止酶促反应。
读数:使用酶标仪在特定波长下测定微孔板的吸光度值。
细胞氧化应激研究:检测细胞在不同刺激条件下 ROS 的产生变化,探究细胞氧化应激的机制。
疾病诊断与研究:在多种疾病如心血管疾病、神经退行性疾病、肿瘤等中,ROS 水平往往发生改变,可作为疾病诊断和病情评估的潜在标志物。
药物研发:评估药物对细胞或生物体 ROS 水平的影响,筛选具有抗氧化活性的药物。
灵敏度高:能够检测到低浓度的 ROS,满足微量样本的检测需求。
特异性强:抗原抗体的特异性结合,有效减少交叉反应,保证检测结果的准确性。
操作简便:试剂盒提供了完整的试剂和操作说明,无需复杂的仪器设备,便于实验室常规检测。
重复性好:严格的生产工艺和质量控制,确保不同批次试剂盒检测结果的一致性和可靠性。