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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,制药 |
|---|
产品介绍
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×预混溶液，包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase，dNTP以及对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系，具有灵敏度高、特异性强、保真性好等优点。在进行扩增反应时，体系只需加入引物和模板即可，简化了实验操作步骤，减少了人为误差，提高了实验通量和结果的重复性。本产品提供是所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能和批次间稳定性。
产品信息
货号 | 12928ES30 |
规格 | 5mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用说明
使用说明正文
文库扩增反应体系（冰上配制）
将表1中试剂解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。
于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1. PCR扩增反应体系
组分 | 体积 (µL) |
模板DNA | X |
正向引物 (10-25 μM） | 1-2.5 |
反向引物 (10-25 μM） | 1-2.5 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix | 25 |
ddH2O | Total to 50 |
使用移液器轻轻吹打货震荡混匀，并短暂离心将反应液收集至管底。
将PCR管置于PCR仪中，设置表2所示反应程序，进行PCR扩增。
表2. PCR扩增反应程序
温度 | 时间 | 循环数 |
98°C | 1 min | 1 |
98°C | 10 sec | 1-15（根据实验要求） |
60°C | 30 sec | |
72°C | 30 sec | |
72°C | 5 min | 1 |
4°C | Hold | - |
【注】：
1)预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；文库为1 min；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2) 退火温度推荐使用60°C，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3) 延伸温度和时间：推荐使用72°C，延伸时间根据实际需要进行调整。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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