生化试剂分离试剂羧基-琼脂糖凝胶 4B C7H4ClNO 现货
【简单介绍】
品牌 | 其他品牌 | 货号 | NR8790 |
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供货周期 | 现货 |
产品名称:羧基-琼脂糖凝胶4B (ECH Sepharose 4B)
基质:4%琼脂糖凝胶
耦合基团:氨基
颗粒大小:90μm
大流速:75cm/h
操作温度:室温
【详细说明】
羧基-琼脂糖凝胶4B是用由环氧树脂耦合方法将6-氨基已酸共价键偶联到琼脂糖4B上。羧基-琼脂糖凝胶4B含有一个10个碳原子连接臂自由羧基,耦合氨基基团的配体。长长的间隔臂使它特别适合固定的小分子。
产品名称:羧基-琼脂糖凝胶4B (ECH Sepharose 4B)
基质:4%琼脂糖凝胶
耦合基团:氨基
颗粒大小:90μm
大流速:75cm/h
操作温度:室温
保存条件:贮存于4°C-8°C(保存溶液为20%乙醇)
使用方法
1.乙醇浸泡:在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干;
2.无盐水浸泡:室温下,在无盐水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的*溶胀,然后;
3.盐酸浸泡:在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗只中性;
4.将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层;
5.上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6.凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50cm以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。难分离物质要有定柱高和流速控制,脱盐时高径比为5:1即可;
7.洗脱方法:可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化;
8.在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
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