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学习怎样使用染色法来于显微镜下观察细胞的死活!

阅读:2932        发布时间:2012-6-12

 真核细胞存活与死亡的观察      

一. 目的:1. 学习如何用染色法来观察细胞的死活

                  2. 了解细胞凋亡和细胞坏死间的差异性

 

                  3. 观察外双溪水质污染对细胞的影响

 

二. 原理:

1. 观察人类细胞的死活:锥蓝染色法

 

锥蓝染色法可以初步的鑑别细胞的死活。细胞死亡后细胞膜不完整,因此染剂可以进入细胞中将其染成深

蓝色,活细胞则因细胞膜完整具有选择性通透的能力,故染剂无法进入细胞内而成无色透明状。但是由于

 

人类科学研究之增进,发现由基因层次引起的细胞死亡时,细胞膜依然为完整的,因此需要进一步观察细

 

胞型态及生化测试去办别细胞的存活与死亡。

 

2. 细胞坏死与细胞凋亡:细胞死亡可分细胞坏死和细胞凋亡两种,其作用机制如下

<1>细胞凋亡:多细胞生物再胚胎发展过程、免疫调节及维持体内环境恒定中,必须藉由引发自杀的

 

机制来移除多馀或功能不全的细胞。这种机制因为受到遗传基因的控制,故又称程式性死亡

 

death>。恶劣的环境如过冷或是过热、紫外线,缺氧或化学药物等都可能使细胞伤害,启动程式引发凋亡,可以

 

保护生物个体,避免细胞脱离控制,造成突长。细胞凋亡一旦发生,将会造成细胞核消失、DNA片段化、zui后细

 

胞分解成许多具有完整细胞膜的凋亡小体。由于细胞膜仍完整,因此其内所含有的细胞分解后有毒

 

物质并不会释放,因此可避免週遭组织的发炎和伤害。这些凋亡小体很快会被週遭的吞噬细胞或其

 

他细胞吸收。

 

<2>细胞坏死:通常是较严重的物理化学伤害所造成,主要是细胞通透性发生改变而膨胀或破裂,并

 

造成溶体释放出各种分解酵素和细胞激素等物质,而使週遭组织受伤引起发炎反应。

 

3. 水中污染物对人类细胞的影响:水中的污染物种类包含微生物,包括细菌、病毒、原生动物等;有机物,包

 

括各种挥发性有机物、合成有机物、消毒副产物、清洁剂、农药等;无机物,包括各种重金属、盐类、氯、溶解

 

性固体物等。这些污染物对于人体的影响甚钜,故藉由观察细胞经污水处理后的改变,则可了解这些污染物对于

 

人类细胞的影响。

 

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