联系电话
上海宝叶生物科技有限公司
中级会员·6年
用氯化铯离心法纯化噬菌体
2012-12-25 阅读(1601)
1．在每毫升zui后的噬菌体悬液（例如来自实验方案13．11）中，加入0．45 g氯化铯，充分混匀至溶解。
2．用吊桶式转头 （或与其相当的型号） 离心溶液，15℃17h，噬菌体将浓缩在组分1和组分2中（。组分1的浓度较高，但组分2的体积较大。用巴氏滴管或塑料注射器吸取这些组分。如果是*次使用本实验方案，那么先收集所有条带并分别对其检测将是明智之举。
3．将收获的溶液对PBS透析过夜。
4．通过感染大肠杆菌DH5cF，或TGl滴定各个不同组分中噬菌体，并保存滴度zui高的组分。通常，噬菌体会集中在1个区带内，而较少的数量会分散在其他区带（如果可见）。加入甘油至10％；按每份样本1013个噬菌体等量分装并储存于-80℃。更进一步的质量控制则可进行蛋白杂交印迹，采用抗标签抗体或抗pⅢ抗体。
用氯化铯纯化噬菌粒。
离心后离心管外观如图示。噬菌体主要浓缩于碎片样区带（组分1）和其下的乳白色区带（组分2）。两条区带均需收集
www.shjsbio.com
上一篇：制备用于抗原上选择的噬菌体抗体
下一篇：从噬菌体文库选择抗原特异性抗体
