联系电话
北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司
中级会员·11年您现在的位置： 北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司>>鼎国昌盛>> NEP062鼎国自产 动物组织 DNA 提取试剂盒
具体成交价以合同协议为准
- 联系人：
- 谭柳
- 电话：
- 010-62210403
- 手机：
- 13146220038
- 传真：
- 86-010-89756821
- 地址：
- 北京昌平区北七家镇东沙工业园384号
- 个性化：
- www.dingguocs.com
- 手机站：
- m.dingguocs.com
扫一扫访问手机商铺
产品简介
产品介绍
鼎国自产 动物组织 / 细胞 / 血液基因组 DNA 提取试剂盒 ；350元
纯化效果检测
取2-5μl得到的DNA产物，0.7%agarose电泳检测DNA分子的完整性和紫外分光光度计检测浓度和纯度。
DNA在260nm处有吸收峰，检测时应该使OD260值在0.1到1.0之间数值较准确。
OD260为1时大概相当于50μg/ml双链DNA，40μg/ml单链DNA。
核酸浓度（μg/ml）=OD260×50×稀释倍数。
OD260/OD280的值应该为1.7~2.0。
常见问题分析：
| 常见问题 | 可能原因 | 建议 |
| 柱子堵塞 | 裂解消化不充分 | 适当延长Proteinase K消化时间。 |
| 样品过多 | 样品量不要超过说明书所定zui大量；可适当增加Proteinase K的用量 | |
| DNA产量低 | 将沉淀倒入柱子导致柱子堵塞 | 加大转速和延长离心时间 |
| Wash buffer A、Wash buffer B没有加无水乙醇 | 按说明书加入无水乙醇 | |
| 洗脱效率低 | 洗脱液使用前于55-65℃预热；洗脱液pH值不合适，应保证在7.5~8.5 | |
| 样品裂解不* | 适当延长裂解时间。 | |
| 样品不够新鲜 | 尽量使用新鲜样品 | |
| DNA纯度低 | 消化不* | 样品量不要超过规定范围；延长消化时间，使样品充分消化 |
| 洗涤不当 | 严格按照说明书步骤洗脱 | |
| 乙醇未除干净 | 适当延长晾干时间，使乙醇充分挥发 |
产品简介：
本试剂盒采用自主研发的*裂解液和酶相结合的方法裂解材料，具有效率高、性能稳定、
重复性高、速度快等特点。材料被裂解并、经蛋白酶K消化后，DNA在高盐低pH的条件下，
与硅基质膜特异性结合，在低盐高pH值条件下，吸附的DNA被洗脱下来。
本试剂盒适用于各种动物组织、动物细胞和血液基因组DNA的提取。
提取的基因组DNA可以直接用作PCR模板、酶切、杂交等分子生物学实验。
组成：
| 成分 | 50次 | 注意事项 |
| RNase A | 0.5 ml | -20℃保存 |
| Proteinase K | 0.5 ml | -20℃保存 |
| Lysis Buffer A | 35 ml | 室温低时可能有白色沉淀产生，加热溶解即可 |
| Lysis Buffer B | 25 ml | |
| Wash buffer A | 27 ml | 用前加入18 ml 无水乙醇，充分混匀 |
| Wash buffer B | 16 ml | 用前加入64 ml无水乙醇，充分混匀 |
| Elution Buffer | 10 ml | |
| 离心柱 | 50个 | 单个zui大吸附量20 μg |
| 红细胞裂解液 | 50ml | 4℃ |
可选试剂
| 编号 | 品名 | 规格 | 价格 |
| NEP033 | 红细胞裂解液 | 100ml | 40.00 |
实验前试剂准备
Wash buffer A中加入18 ml 无水乙醇，充分混匀。
Wash buffer B中加入64 ml无水乙醇，充分混匀。
储存条件： 请按照上表中注意事项的条件保存，其他未说明的可常温或4度保存。
步骤：
1、样品处理
全血：取50-300 μl全血，加入3倍体积的红细胞裂解液，震荡混匀，12000rpm离心1min，
去上清。加入600 μl Lysis Buffer A，震荡混匀。
禽血：加入10-100 μl禽血，直接加入600 μl Lysis Buffer A，颠倒混匀。
动物组织：取20-50mg动物组织，液氮研磨或匀浆，加入100 μl PBS重悬样品，
然后加入到准备好的600 μl Lysis Buffer A，振荡混匀。
动物细胞：离心收集105-106个培养细胞，加入100 μl PBS重悬细胞，
加入600 μl Lysis Buffer A，震荡混匀。
2、 加入10 μl Proteinase K，60 ℃水浴20 min～40 min，其间颠倒混匀数次。
如需消化RNA,可待样品裂解*后加入10 μl RNase A，混匀，室温放置10 min。
若加入样品较多，可适当延长水浴时间，适量增加Proteinase K的量，按比例增加
Lysis Buffer A和Lysis Buffer B量。
3、 加入400 μl Lysis Buffer B，漩涡震荡30 s。
4、 12,000 rpm离心5 min，将上清转入离心柱中，静置2 min。
上清可能出现少量白色漂浮物，此为未消化*的细胞和蛋白质。
5、 12,000 rpm离心1 min，弃废液。
6、 加入700 μl Wash buffer A（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心 1min，弃废液。
7、 加入700 μl Wash buffer B（使用前请先检查是否已加入无水乙醇）， 12,000 rpm离 心 1min，弃废液。
8、 加入500 μl Wash buffer B，12,000 rpm离心1 min，弃废液。
9、 再次12,000 rpm离心2 min，将离心柱置于新的离心管中，并打开离心柱盖，于室温或37 ℃恒 温箱放置5~10min，
直至无明显乙醇味。
10、在硅基质膜中央加入50～200 μl Elution Buffer或双蒸水(事先预热55～65 ℃)，置于室 温2 min，12,000 rpm离2 min。
所得液体即为基因组DNA溶液。
相关产品
