脯*酸（Pro）含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0295
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：自备冰乙酸。

2. 标准品：脯*酸10 mg，临用前加入1 mL蒸馏水，配成10 mg/mL标准品。

产品说明：
脯*酸（Pro）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯*酸。因此，脯*酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。
用磺基水杨酸（SA）提取Pro，加热处理后，Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色，在520nm测定吸光度。
技术指标：
低检出限：0.2876 μg/mL
线性范围：0.5-40 μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰乙酸、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 提取液中含有蛋白沉淀剂，提取的上清液不能用于蛋白浓度的测定。

2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定

参考文献：

1. Vieira S M, Silva T M, Glória M B A. Influence of processing on the levels of amines and proline and on the physico-chemical characteristics of concentrated orange juice[J]. Food chemistry, 2010, 119(1): 7-11.

2. Demiral T, Türkan I. Comparative lipid peroxidation, antioxidant defense systems and proline content in roots of two rice cult ivars differing in salt tolerance[J]. Environmental and experimental botany, 2005, 53(3): 247-257.

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