血红蛋白（Hb）含量检测试剂盒说明书

微量法

货号：BC5585

规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 标准品：临用前加入1mL蒸馏水充分溶解，即为10mg/mL血红蛋白标准品，2-8℃可保存4周。

2. 0.625mg/mL标准品配制：取50μL10mg/mL血红蛋白标准品，加入750μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.625mg/mL的血红蛋白标准品使用，现配现用。

产品说明：

血红蛋白（Hemoglobin，Hb）是一种含有血红素的辅助因子蛋白，在输送和储存氧气方面有重要作用。血红蛋白分子由四个多肽链蛋白组成，两条α链和两条β链，每条链有一个包含一个铁原子的环状血红素，氧气结合在铁原子上，被血液运输。

使用改进的羟碱法测定血红蛋白含量，血红蛋白与工作液生成有色物质，在400nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与血红蛋白含量成正比。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

全血/溶血液/血浆/血清：直接测定。血清、血浆若有浑浊请离心后取上清置于冰上待测。

二、测定步骤

1、 可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2、 操作表：（在1.5mLEP管中依次加入以下试剂）

三、血红蛋白（Hb）含量的计算

血红蛋白含量（mg/mL）=ΔA测定÷（ΔA标准÷C标准）×F=0.625×ΔA测定÷ΔA标准×F

C标准：标准品的浓度，0.625 mg/mL；F：稀释倍数。

注意事项：

1. 如果样本测定吸光值大于1.5，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

2. 如果样本测定吸光值小于0.01或接近空白管吸光值，可适当增大样本量，空白管和标准管也需要进行相应调整。

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