目录:北京索莱宝科技有限公司>>生化检测试剂盒-微量法>>微量法生化试剂盒>> BC4185-100T/96S莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 微量法
CAS | 详询 | 纯度 | 详询 |
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分子量 | 详询 | 分子式 | 详询 |
供货周期 | 现货 | 规格 | 100T/96S |
货号 | BC4185 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
主要用途 | 莽草酸脱氢酶(SD)活性检测 |
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
提取液:内含不溶物,用前摇匀。
试剂二:临用前加入5 mL蒸馏水溶解。
试剂三:临用前每瓶加入10 mL蒸馏水溶解。
工作液的配制:根据用量按照试剂一:试剂二:试剂三为7:4:8的体积比例充分混匀,备用,用前25℃预热15min。
紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,紫外分光光度计蒸馏水调零。
工作液25℃预热10min以上。
操作表:在微量石英比色皿/96孔UV板中分别加入下列试剂:
试剂名称 | 空白管 | 测定管 |
工作液(µL) | 190 | 190 |
样本(µL) | 10 | |
蒸馏水(µL) | 10 | |
加入样本即开始计时,充分混匀后于340nm处测定20s时的吸光值A1和5min20s时的吸光值A2,计算ΔA测定管=A2测定-A1测定,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次)。 |
按蛋白浓度计算
按样本质量计算
按细胞数量计算
按液体体积计算
样本提取上清液置于冰上待测,且样本提取完成后建议2h内测完。
样本的蛋白浓度需自行测定,由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1 mg/mL),所以测定样本蛋白浓度时需扣除提取液自身蛋白浓度。
ΔA大于1时,建议将样本稀释后再进行测定。当ΔA小于0.01时,可以延长反应时间(10min或15min)来测定。
空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.01。
取0.1g稗草,加入1mL提取液,进行样本处理,取上清按照测得步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.2771-0.2433=0.0338,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0338,按照样本质量计算得:SD酶活(U/g 质量)=643×ΔA÷W=217.334 U/g 质量。
莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 微量法 莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 微量法