组织总磷含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2855
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：强腐蚀性，强氧化性；易挥发，不使用时请及时盖紧盖子；

2. 试剂三A：临用前加入5 mL蒸馏水溶解，用不完的试剂2-8℃保存4周；

3. 试剂三B：临用前加入5 mL蒸馏水溶解，用不完的试剂2-8℃保存4周；

4. 试剂三：临用前按试剂三A：试剂三B：试剂二=1:1:1的体积比例配制，配好的试剂三应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，试剂三根据样本量现用现配，限当天使用；

5. 标准品：10mmol/L无机磷标准液。

产品说明：
磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率，进而为合理施肥提供依据。
总磷经消化后，转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法，一定条件下，钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm光吸收，即可计算无机磷含量，进而可计算出组织中总磷含量。

技术指标：
低检出限：0.0338 mmol/L
线性范围：0.625-8 mmol/L
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水和浓硫酸（99%）。

操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

注意事项：
1、如果样本测定吸光值大于1.5，需用蒸馏水做相应稀释后进行测定。如果样本测定吸光值较低或接近空白值，建议增大样本量后重新进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例：

1. 取0.1g小鼠肾脏按照提取步骤操作，离心取上清之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算 A测定管=0.191，A空白管=0.051，A标准管=0.282，按样本质量计算总磷含量得：总磷含量(mmol/g 质量)=0.005×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W= 0.030 mmol/g 质量。

2. 取0.1g小鼠脾按照提取步骤操作，离心取上清之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算 A测定管=0.197，A空白管=0.051，A标准管=0.282，按样本质量计算总磷含量得：总磷含量(mmol/g质量)=0.005×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W= 0.032 mmol/g 质量。

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