血清总铁结合能力（TIBC）检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2865
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂四：临用前根据用量将A液和B液按1:1混合；

2. 标准品：临用前加0.9mL蒸馏水溶解，得到40μmol/mL FeSO₄溶液，2-8℃保存8周。

产品说明：
血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
Fe²⁺与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe³⁺结合，剩余未结合的Fe³⁺可以被还原成Fe²⁺，此时吸光度A1与未结合Fe³⁺数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe³⁺释放，并且进一步被还原成Fe²⁺，此时吸光度A2与总Fe³⁺数量正相关。A2减A1与TIBC呈正比。

技术指标：
低检出限：第一次测量的检出限为0.00098 μmol/mL；第二次测量的检出限为0.0012 μmol/mL。
线性范围：第一次测量的线性范围为1.95×10^-3-0.5 μmol/mL；第二次测量的线性范围为1.95×10^-3-0.5 μmol/mL。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、EP管、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
1. A1测小于0.1时，建议将样本用蒸馏水适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂二、试剂四有一定的毒性，操作时请做好防护措施。
实验实例：

1. 取40μL用蒸馏水稀释2倍的骆驼血清，按照测定步骤操作，测得计算ΔA1测=A1测-A1空=0.342，ΔA1标=A1标-A1空=0.746，ΔA2测=A2测-A2空=0.735，ΔA2标=A2标-A2空=0.550，计算总铁结合能力得：

总铁结合能力TIBC（μmol/L）=500×（ΔA2测÷ΔA2标-ΔA1测÷ΔA1标）×2=877.919 μmol/L。

1. 取40μL用蒸馏水稀释2倍的鹅血清，按照测定步骤操作，测得计算ΔA1测=A1测-A1空=0.191，ΔA1标=A1标-A1空=0.746，ΔA2测=A2测-A2空=0.732，ΔA2标=A2标-A2空=0.550，计算总铁结合能力得：

总铁结合能力TIBC（μmol/L）=500×（ΔA2测÷ΔA2标-ΔA1测÷ΔA1标）×2=1074.877 μmol/L。
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