目录:北京索莱宝科技有限公司>>生化检测试剂盒-微量法>>微量法生化试剂盒>> BC1975-100T/48S土壤木质素过氧化物酶检测试剂盒 微量法
| CAS | 详询 | 纯度 | 详询 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 详询 | 分子式 | 详询 |
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 100T/48S |
| 货号 | BC1975 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
| 主要用途 | 测定意义：木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物 |
土壤木质素过氧化物酶（S-Lip）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1975
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
产品说明：
木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，属于木质素降解酶系，在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛，在310nm处有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品：
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、移液器、水浴锅、震荡仪、研钵、甲苯（> 98%，AR）、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤
紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至310nm，紫外分光光度计蒸馏水调零。
样本测定（在1.5mL EP管中依次加入以下试剂）：
| 对照管 | 测定管 | |
| 土样（g） | 0.04 | 0.04 |
| 甲苯（μL） | 30 | 30 |
| 充分混匀，室温静置15min | ||
| 试剂一（μL） | - | 200 |
| 蒸馏水 | 200 | - |
| 试剂二（μL） | 120 | 120 |
| 试剂三（μL） | 80 | 80 |
| 充分混匀，30℃振荡反应3h，冰浴5min，12000g 4℃离心10min，小心取200μL上清液于微量石英比色皿中或96孔UV板中测定310nm处的吸光值，分别记为A测定、A对照，计算ΔA=A测定-A对照。 注：若上清液不澄清可将上清液全部取出，再次离心后吸取200μL上清液测定。 |
实验实例：
称取两份0.04g槐树土土样于EP管中，分别为测定管及对照管，之后按照测定步骤操作，用96孔UV板测得ΔA=A测定-A对照=1.069-0.374=0.695，按土样质量计算酶活得：
S-LiP活性（U/g 土样）=25.687×ΔA÷W=25.687×0.695÷0.04=446.312 U/g 土样。
称取两份0.04g冬青土土样于EP管中，分别为测定管及对照管，之后按照测定步骤操作，用96孔UV板测得计算ΔA=A测定-A对照=0.424-0.185=0.239，按土样质量计算酶活得：
S-LiP活性（U/g 土样）=25.687×ΔA÷W=25.687×0.239÷0.04=153.480 U/g 土样。
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