Far-Western Blot分析

Far-Western Blot分析检测技术服务详情介绍

Far-Western Blot是一种基于Western Blot技术的分子生物学方法，可用于检测体外dànbáizhì与dànbáizhì的相互作用，尤其是不需要目标dànbáizhì的天然结构的相互作用检测。

Far-Western Blot技术的整体工作流程与Western Blot相似，只是Western Blot中探测目标dànbáizhì需要抗体，而Far-Western Blot分析中不需要抗体，而是使用经过纯化和标记的“诱饵”蛋白来探测和检测膜上的目标蛋白。在Western Blot和Far-Western Blot中，dànbáizhì都是通过SDS凝胶和native PAGE凝胶对样品进行分离，然后将dànbáizhì从凝胶转移到膜上。转模后，用BSA进行封闭。在膜上对dànbáizhì进行变性和复性，及后续的检测步骤。Far-Western Blot技术用商业化的高度纯化的诱饵蛋白将膜标记上探针。在诱饵蛋白与目标蛋白反应后，根据所使用的诱饵蛋白，可以检测到与该目标蛋白相对应的条带。

为了鉴定与给定蛋白相互作用的蛋白，Far-Western Blot是一个实验成本低、灵敏度高的有效平台。远western blotting的原理是对western blotting的改进，以自然折叠的重组蛋白作为dìyī个探针，与转染到PVDF膜上的蛋白相互作用。Far-Western Blot使用的第二个探针是针对给定蛋白的特异性抗体，而酶标的第三个探针是针对第二个探针的抗体。当与LC-MS-MS蛋白鉴定相结合时，可以对得到的蛋白斑点(或蛋白条带)进行表征，然后进行进一步的功能分析，如蛋白免疫沉淀等。

Far-Western Blot分析时，当需要保留dànbáizhì的天然构象和天然相互作用时需要注意以下问题：1）变性条件下在SDS凝胶中分离的dànbáizhì可能会发生变性，而变性蛋白可能不会与诱饵蛋白发生反应，从而导致无法识别出相互作用。2）在结合之前将dànbáizhì变性并复性，也可能导致dànbáizhì发生构象变化，从而影响靶蛋白与诱饵蛋白的结合。3）如果结合位点受其它因素影响，失去与诱饵蛋白的结合能力，使诱饵蛋白无法与之反应，也可能导致相互作用检测失败。更棘手的是，以非天然构象呈现的dànbáizhì可能以新的非天然方式发生相互作用，导致检测假阳性。

百泰派克生物科技提供Far-Western Blot分析服务，可以根据您的需求定制实验，并对可能影响结果的潜在因素进行评估。我们承诺给出的数据可靠，且可重复性高。

Far-Western Blot分析的优势

• 可用于体外dànbáizhì相互作用研究 • 分析蛋白的结合域 • 比较dànbáizhì结合的亲和力 • 无需特异性抗体

Far-Western Blot分析的工作流程

• 定量dànbáizhì，并通过SDS或native PAGE分离 2. 将dànbáizhì从凝胶转移到膜上 3. 将dànbáizhì进行变性和复性，以保证膜上的dànbáizhì结合位点充分暴露 4. BSA缓冲液对膜进行封闭 5. 将膜与纯化的诱饵蛋白进行孵育 6. 检测诱饵蛋白信号 7. 图像分析及报告交付

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对dànbáizhì序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对dànbáizhì的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服务。对于未知理论序列的dànbáizhì，提供基于从头测序法的dànbáizhì从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上优良的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、dànbáizhì组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量dànbáizhì组学、靶向dànbáizhì组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种dànbáizhì组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种dànbáizhì标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术优良，*技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从dànbáizhì、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖dànbáizhì组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

Far-Western Blot分析检测技术服务详情介绍