小鼠小肠血管内皮原代细胞
参考价 | ¥1-¥560/件 |
- 公司名称 上海研生实业有限公司
- 品牌上研生
- 型号
- 所在地上海市
- 厂商性质经销商
- 更新时间2025/5/20 12:25:01
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供货周期 | 现货 | 规格 | 5×10⁵ |
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货号 | YS-01X7146 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
主要用途 | 仅供科研实验 |
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
细胞属性:
方法简介
公司实验室分离的小鼠小肠血管内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠小肠血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 小鼠小肠血管内皮原代细胞 | 组织来源 | 小肠组织 |
英文名称 | Mouse Small Intestine Vascular Endothelial Cells | 货号 | YS-01X7146 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介:
小鼠小肠血管内皮细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。血管内皮细胞除了吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织等,还参与集体免疫活动,包括:①血管收缩及血管舒张,从而控制血压;②凝血(血栓形成及纤维蛋白溶解);③动脉硬化;④血管生成;⑤炎症及肿胀(浮肿);⑥内皮细胞亦控制一些物质,如白血球进出血管。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品:
人正常上皮细胞;MCF 10A | 5-三酸肌醇受体2抗体 |
过氧化还原酶5/6抗体 | 20号染色体开放阅读框27抗体 |
胶质细胞谷运载蛋白1抗体 | G蛋白偶联受体24抗体 |
细胞分化周期CDC42蛋白抗体 | 癌中心体相关蛋白抗体 |
细胞毒性T细胞抗原-4抗体 | 羟基类固醇脱氢酶3α抗体 |
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) | CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
尿道上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人细胞裂解液 (阳性对照) |
Bcap-37(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R115大鼠小梁网细胞培养基100mL EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-16 | FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人细胞裂解液 (阳性对照) |
EPCAM Others Mouse 小鼠 EpCAM / OP1 / CD326 人细胞裂解液 (阳性对照) | PT-67细胞,病毒转染小鼠细胞 人肺巨细胞癌(PG)的高转移亚系,PG-BE1细胞 肠微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
CM-H024人胰腺星状细胞培养基100mL | 小鼠小肠血管内皮原代细胞G蛋白偶联受体24抗体 |
HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮细胞系 昆虫卵巢细胞,SF9细胞 NK-92(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞) | 人内根壳细胞cDNAHHIRSC cDNA |
CM-R054大鼠子宫成纤维细胞培养基100mL | DPEP2 Others Human 人 DPEP2 / MBD-2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
小鼠条纹细胞(MN-s)(1×106) 5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系 Human | 钙粘附蛋白8抗体 |
DNA修复酶Ku70抗体 | Panc 10.05细胞,人胰腺腺癌细胞 人舌鳞癌细胞系,TSCCA细胞 大鼠脑胶质瘤细胞;C6 |
水通道蛋白-9抗体 | 核因子1B抗体 |
脑胶质瘤发病相关蛋白2抗体 | 人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) |
操作步骤:
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。