实时单细胞多模态分析仪

一、实时单细胞多模态分析仪的功能概述：

单细胞研究对于理解细胞的组成、生理行为与功能的多样性具有重要意义，基因组、转录组、蛋白组、代谢组学等分析技术为单细胞研究提供了有力工具。可以实时、连续、定量检测单个活细胞的小分子含量及酶活性。

二、主要性能：

实时单细胞多指标检测：实时检测单个活细胞内小分子含量（如葡萄糖、乳酸、ATP、Ca2+、K+等）及酶活性（葡萄糖苷酶、鞘磷脂酶、乳酸脱氢酶等），可匹配160余种商品化试剂盒；

实时亚细胞原位检测：在亚细胞水平（胞质、胞核、胞膜）实时连续、原位检测；

超微量提取、注射：单细胞水平提取细胞器（如溶酶体、线粒体）、胞质进行质谱或其它平台的联用分析；单细胞注射药物、代谢剂等，并进行药效评估；

活体水平检测：活体水平实时检测生化指标（用药前后、中医药针灸刺激前后）的变化；

电信号检测：通过电探头对细胞释放的电活性物质进行检测，如过氧化氢、一氧化氮、多巴胺、超氧阴离子等物质。

三、实时单细胞多模态分析仪的经典应用：

肿瘤细胞异质性研究，包括糖代谢、脂代谢、蛋白代谢相关的小分子和酶活分析；

结合抑制实验，研究肿瘤细胞代谢过程中关键激活酶，为抗癌药物研发提供理论基础；

通过抗癌新药直接刺激细胞或配合专用探头实现细胞内送药，评估其对单细胞内代谢参数指标的影响。

四、代表文献：

1)ZhengXT,Yang

HB,LiCM.Opticaldetectionofsinglecelllactatereleaseforcancermetabolicanalysis.AnalChem.2010Jun15;82(12):5082-7.(DOI:10.1021/ac100074n)  

2)PanR,XuM,JiangD,BurgessJD,ChenHY.Nanokitforsingle-cellelectrochemicalanalyses.ProcNatlAcadSciUSA.2016Oct11;113(41):11436-11440.(DOI:10.1073/pnas.1609618113)  

3)ZhengXT,LiCM.Singlelivingcelldetectionoftelomeraseover-expressionforcancerdetectionbyanopticalfibernanobiosensor.BiosensBioelectron.2010Feb15;25(6):1548-52..(DOI:10.1016/j.bios.2009.11.008)  

4)ZhengXT,HuW,WangH,YangH,ZhouW,LiCM.Bifunctionalelectro-opticalnanoprobetoreal-timedetectlocalbiochemicalprocessesinsinglecells.BiosensBioelectron.2011Jul15;26(11):4484-90.(DOI:10.1016/j.bios.2011.05.007)  

五、新药研究介绍：

（1）药物的极性和分子量会影响其透过细胞膜的效率，如果药物的细胞膜透性较低或未知，可以单细胞内定点注射药物并实时检测药效相关指标（Ca2+和ROS等），可以反映药物发挥作用的潜在位置；

（2）为了理解药物作用机制，需要预先判断可能的转运体、药物靶点、及涉及到的关键代谢酶，然后通过单细胞多模态分析仪进行验证，由于是实时的，可以添加相关抑制剂或增强剂直接进行判断验证；

（3）用于单细胞亚细胞水平的定向给药及实时原位检测药物作用效果，提供亚细胞水平药物-细胞相互作用研究的重要工具，实现单细胞层面药物保护性研究和抑制性研究，可为药物载体的单细胞层面载药能力研究和亚细胞层面的定位提供选择性平台。

六、神经领域应用：

单细胞胞质的超微量抽提，和质谱平台联用完成递质成分的分析；

纳米级探头实现单个神经细胞或脑组织的小分子电化学检测；

中医药领域，可对特定穴位血清素（5-羟色胺）、一氧化氮、乙酰。胆。碱、抗坏血酸等关键指标的实时监测，可配合组织解剖学实验，研究不同组织类型的指标差异，辅助针灸机理研究；

活体动物模型在体检测，辅助肿瘤疾病药物研究。

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