Celigo 全视野细胞扫描分析仪

一、全视野细胞扫描分析仪的原理介绍：
（1）Celigo Image Cytometer是一款新科技的细胞全孔高速扫描成像分析仪。

（2）Celigo 细胞成像分析仪可分析生长在微孔板和 T‐flask 中的贴壁和非贴壁（悬浮）细胞，具有超越传统方法的更好的优势。

（3）具有一致的，高质量，全孔的明亮视野（brightfield）成像功能，结合强大的分割软件可在 5 分钟内获得整个微孔板的所有孔中的所有细胞的高质量数据。Celigo 具有非破坏性和非侵入性明亮视野分析功能，并有多色荧光功能作补充，使系统适合任何基于细胞的广泛的实验。

（4）其分辨率足够高，达到1um成像精度，相当于显微镜15X放大倍数，对于处理单个细胞的信号识别是足够清晰完整的。

二、全视野细胞扫描分析仪的斑马鱼（北京）科技有限公司，是PerkinElme珀金埃尔默的经销商，负责产品的推广销售和技术支持，为您提供仪器的参数、价格、选型、技术原理等信息，更多信息可咨询。

Celigo的典型图像如下：

三、其次，在这种成像精度下，如何实现对1536孔，384孔，96孔，24孔，甚至6孔板的全孔成像呢？这涉及到其采用的一个光学技术，应用一个大型的F-theta透镜和电磁检流计镜片来对全孔进行大面积快速扫描。其技术原理图如右。在该技术下，透镜的位移*由电磁推动，安静快速而*没有机械位移，其精度可小于1um，从而保证了后续的多图像拼接保持了一致性。

这就带来了细胞大规模图像分析的几个好处：

☆ 原位in situ
在细胞生长的过程中无需消化细胞，无需取样，无需进行任何处理，可在任何时间点随时成像，随时分析，随时获得统计学数据处理结果。

☆ 全孔 full well
如6孔板一个孔的完整细胞图像，由256张细胞图像拼接而成；96孔板一个孔的完整细胞图像，由16张细胞图像拼接而成。由于每个孔均是高清晰度的全孔细胞分析，从而保证了统计学意义的一致性。（孔与孔之间由于细胞加样量的差异，细胞生长的差异，悬浮沉降细胞移动导致的固定小视野不能准确追踪等问题均得到解决。）

☆ 全孔照明亮度的均一。这是由于扫描光路的特性带来的。图像见下：

☆ 快速。这是系统的扫描光路电磁透镜技术带来的。其处理全孔高精度图像分析下的处理速度如下：

☆ 整板whole plate
整板的全孔图像预览和曲线分析带来一目了然的细胞分析结果，而这一切均在<10min的速度下完成，从而简单实现多时间点的整板细胞生长分析快速追踪。
适用于各种规格细胞培养板（6/12/24/96/384/1536孔板）和培养瓶(T-25&T-75)。

☆ 多通道multi channels
共有四个通道，采用四个独立的LED光源，包括一个高质量的明场通道，和三个荧光通道。标配：
- 蓝色荧光：ex/em377/477(e.g., Hoechst, DAPI)
- 绿色荧光：ex/em483/536(e.g., FITC, Calcein, Alexa Fluor 488, GFP)
- 红色荧光：ex/em531/629 (e.g., PI, Texas Red, Alexa Fluor 568)
选配：可替换以上三个荧光的任一通道
- Far-Red (e.g. Alexa Fluor 647, DRAQ5)

Celigo能做什么？
Celigo是一款基于多荧光通道细胞成像的快速全孔&整板扫描分析仪，因此基于细胞成像的关于全孔的细胞生长监测和全孔的细胞荧光功能检测的应用，都可以选择Celigo。

☆ 基于高质量明场的细胞生长分析 Label-free assays

灵活的分析软件设计可以通过两种分析方法获取细胞增殖曲线。

☆ 基于荧光通道的细胞功能分析Fluorescence assays

应用举例：

细胞活性（毒性）分析 Cell Viability(Toxicity)
通过Calcein AM/PI/Hoechst33342三种荧光染料分别标记活/死/全部细胞。通过Celigo可轻松获取全孔&整板细胞图像和自动报告活死细胞百分比，以及不同组别的对照数据。

细胞增殖(DNA合成)Cell Proliferation(DNA Synthesis)
细胞图像数据
A．96孔板全孔A549细胞图像（BrdU-绿色，DAPI-蓝色）；B．局部放大全孔细胞图像（DAPI-所有细胞，BrdU-S期细胞）

设门数据

克隆形成Colony Formation

细胞迁移（损伤修复）Cell Migration(Wound Healing)
使用Oris Platypus专用损伤修复板，通过Celigo自动分析明场&荧光通道细胞数量或细胞融合度，获得损伤修复/迁移的细胞增殖情况。

荧光蛋白表达Fluorescence Proteins
96孔板中扫描全孔Hela细胞转染后GFP/RFP表达的情况。

瞬时转染不同浓度的编码turbo-GFP的质粒到Hela细胞，转染后多个时间点分析96孔板中GFP阳性表达率，GFP阳性细胞数，以及死细胞（PI标记）的百分比。

3D肿瘤球分析3D Tumor Speroid

17-AAG和PI-103浓度依赖性的肿瘤球生长抑制。

（a) 细胞接种、加药、Celigo成像和分析流程图；(b-g) 不同药物浓度对肿瘤球生长的抑制情况。

细胞重编程iPSC Reprogramming

小鼠胚胎成纤维细胞通过Yamanaka方法诱导生成iPSC，通过Celigo扫描6孔板检测和分析iPSC克隆形成情况。
Data courtesy of Kaji Lab, MRC Centre for Regenerative Medicine, University of Edinburgh

干细胞多能性鉴定Stem Cell Pluripotency

诱导后的多能干细胞通过Celigo检测特异性多能干细胞的标记（OCT4，SSEA4）。