IgG1κ 单克隆抗体 标准物质（RM 8671）

       美国NIST的 IgG1κ 单克隆抗体 标准物质（RM 8671）主要用于评估确定单克隆抗体的物理化学和生物物理属性的方法的性能。它还为开发用于治疗性蛋白质表征的新技术提供了一个具有代表性的测试分子。此外IgG1κ 单克隆抗体 标准物质（RM 8671）可用于多种用途，包括系统适用性测试、确定方法或仪器性能和可变性、比较变化的分析测试方法以及协助方法鉴定。

包装规格：

         RM8671由一个内螺纹聚丙烯冷冻管组成，其中含有 800 µL 10 mg/mL NIST IgG1κ 单克隆抗体 (NISTmAb)，溶于 12.5 mmol/L L-组氨酸、12.5 mmol/L L-组氨酸 HCl (pH 6.0) ）。

        美国NIST的gG1κ 单克隆抗体 标准物质（RM 8671）是一种在鼠悬浮培养中表达的重组人源化 IgG1κ，并经过生物制药行业标准的上游和下游纯化，以去除工艺相关的杂质。它是通过链间和链内二硫键连接的两条轻链和两条重链亚基的约 150 kDa 同源二聚体。该分子具有高丰度的 N 末端焦谷氨酰胺化、C 末端赖氨酸剪切和重链糖基化。该蛋白质还具有低丰度的翻译后修饰，包括蛋氨酸氧化、脱酰胺和糖化 [1-4]。这些和其他产品质量属性在 ACS Symposium 系列中针对第一批临时材料进行了广泛的描述，在本文中用作主要样品 (PS) [5-7]。

有效期：非认证值在规定的测量不确定度内有效，直到 2026 年 4 月 29 日。如果材料存储或使用不当、损坏、污染或以其他方式修改，则赋值无效。

非认证值：NIST 非认证值是基于当前可用信息的最佳估计值，从 1987 年到 2020 年 7 月被称为“参考值”或“信息值”[8]。非认证值适用于方法开发、方法协调和过程控制，但不提供对国际单位制 (SI) 或其他高阶参考系统的计量溯源。

表 1 至表 5 中提供了 IgG1κ 单克隆抗体 标准物质（RM 8671）的非认证值。此 RMIS 中描述的特定协议和结果的全面扩展可在参考文献 [9-13] 中找到。质量浓度非认证值：表 1 中列出的质量浓度值基于在 280 nm 处测得的十进制衰减 D。十进制衰减 D 被计算为透射率的负对数（以 10 为底），它类似于吸光度，除了包含对离开样品的辐射功率的散射和发光效应 [14]。 NISTmAb 的浓度通过使用 1.42 mL · mg-1 · cm-1 [15,16] 的理论消光系数 (ε) 确定。该值是根据 [16] 报告的方法计算的，并进一步校正了 0.977 [15] 的聚糖质量分数校正因子。可以在参考文献 [9] 中找到分析方法的详细信息以及对与此质量浓度测量相关的不确定性的贡献。

物理化学非认证值：IgG1κ 单克隆抗体 标准物质（RM 8671）的物理化学属性使用合格的尺寸排阻色谱 (SEC)、毛细管十二烷基硫酸钠电泳 (CE-SDS)、毛细管区带电泳 (CZE) 和动态光散射 (DLS) 方法进行测量 [10 ,11]。使用原始样品 (PS) 对这些分析测定进行了鉴定，以建立方法性能标准。资格验证活动以 ICH Q2(R1) 方法验证指南为模型，包括评估线性、检测限 (LOD)/定量限 (LOQ)、范围和精密度（可重复性和一些中间精密度）。表 2、3、4 和 5 中提供的物理化学值是通过使用每种合格方法（SEC、CE-SDS、DLS 和 CZE）分析 Lot 14HB-D-002 来认定的，同时用仪器认证 (IQ) 括起每个分析标准和 PS 以确保系统适用性。 IQ 标准和 PS 都需要通过从方法鉴定得出的预定义方法性能标准。可以在参考文献 [9-11] 中找到分析方法的详细信息以及对与测量相关的不确定性的贡献。在参考文献 [9-13] 中可以找到关于物理化学测量的特定协议和结果的全面扩展。

附加信息：包括流动成像分析和肽图鉴定测试在内的附加物理化学表征方法也适用于 RM 8671，并在附录 A 中报告。

储存：RM 用干冰运输，运输过程中应保持冷冻状态。材料应在收到后立即在 -80 °C 下冷冻保存。对一系列稳定性样品进行了评估，以确定最佳的储存条件，在该条件下，样品可能会在给定的方法中保持其物理化学性能 [9]。在所有情况下，最好将材料储存在 -80 °C。如果需要在 -80 °C 以外的条件下制备和/或储存等分试样，则在给定条件和某些预期用途下推荐的最长储存时间列于表 6。

处理和使用说明：应将小瓶从 -80 °C 冰箱中取出，在室温下解冻约 30 分钟或直至没有残留冰晶。一旦解冻，小瓶应轻轻倒置五次，以减轻冷冻过程中可能形成的任何浓度梯度。然后，小瓶应在微型离心机中快速旋转，以沉淀任何可能仍粘附在小瓶盖或内螺纹上的溶液。一旦打开，小瓶内容物应立即使用和/或根据材料的预期用途在表 6 中列出的预定义条件下储存。可以通过转移等分试样并稀释至适当体积来制备较低浓度的蛋白质溶液。 RM 不提供稀释剂；然而，可以使用含水稀释剂，例如制剂缓冲液（12.5 mmol/L L-组氨酸，12.5 mmol/L L-组氨酸 HCl，pH 6.0）。 NIST 尚未在稀释或浓缩条件下对材料的溶解度和稳定性进行全面测试，因此可能不符合本文所述分析测定的预期。