猪蓝耳病病毒通用型（PRRSV-U）核酸检测试剂

反应五要素:
猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸检测试剂盒图片参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

使用及效果：
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（zui多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
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自备物品：
猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸检测试剂盒图片15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶标板：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
酶标仪：用于微量样品比色分析
储存条件：
14℃或－20℃
准备物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份

4-环己啉分子式：分子量：英文名称：4- cyclohexyl morpholineCAS号：

氧嗪酸钾分子式：195.17分子量： C4H2KN3O4英文名称：Potassium oxygenCAS号：2207-75-2

2-羟-4-甲吡分子式：109.13分子量： C6H7NO英文名称：2- hydroxy -4- methyl pyridineCAS号：13466-41-6

叠氮磷酸二酯（DPPA）分子式：275.2分子量： C12H10N3O3P； (C6H5英文名称：Two phenyl phosphate (DPPA)CAS号：26386-88-9

1-吡唑分子式：144.17分子量： C9H8N2英文名称：1- phenylCAS号：1126-00-7

偶氮二甲酰二分子式：252.31分子量： C12H20N4O2英文名称：Two azo two benzoyl piperidineCAS号：10465-81-3

木香烃内酯英文名称：CostunolideCAS号：553-21-9分子式：232.32分子量：C15H20O2

泰妥拉唑分子式：368.39分子量： C16H17N4NaO3S英文名称：Tai, ThaiCAS号：113712-98-4

萘英文名称：NaphthaleneCAS号：91-20-3分子式：128.17分子量： C10H8

罗卡因英文名称：RopivacaineCAS号：84057-95-4分子式：274.4分子量： C17H26N2O

嘧肟草英文名称：Ether of theCAS号：168088-61-7分子式：609.59分子量： C32H27N5O8

猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸检测试剂盒图片IRF7  干扰素调节因子7抗体 0.1ml

E.coli O6  大肠杆菌埃希杆菌O6抗体（肠致病性大肠杆菌O6） 0.2ml

ADCK3/CABC1  伴侣蛋白bc1同源复合体抗体 0.2ml

CD36/PAS-4  CD36抗体 0.1ml

RIP1  受体相互作用蛋白激酶1抗体 0.2ml

CK42  细胞角蛋白42 0.1ml

LEU5/RFP2  白血病相关蛋白5抗体 0.2ml

MTLR  胃动素受体抗体 0.1ml

IL-4 (human)  白介素4抗体(人) 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser253)  磷酸化叉头蛋白3A抗体 0.1ml

Rabbit Anti-Mink IgG/PE  PE标记的兔抗水貂IgG 0.1ml

MKKS/BBS6  巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体 0.2ml