大鼠子宫平滑肌原代细胞

大鼠子宫平滑肌原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠子宫平滑肌细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚，由成束或成片的平滑肌组成，肌束间以结缔组织分隔。子宫平滑肌具有收缩功能，收缩受激素的调节，其收缩活动有助于精子向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出。子宫平滑肌层含有大量的血管，如果平滑肌层细胞过度生长，势必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能：①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态，在孕期能大化的扩张子宫容积，保证胎儿孕育环境；②平滑肌细胞有收缩舒张能力，在生产时能形成生理性的缩腹环，推动胎儿向下移动，辅助生产。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

LX-2, 人肝星形细胞株 Human  RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)     大鼠雪旺细胞;RSC96  Calu-6细胞，人肺癌细胞系(未分化) 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞 CM-M097小鼠皮下脂肪细胞100mL 兔原代尾尖成纤维细胞 小鼠原代角质形成细胞

P选择素(SELP)重组蛋白 Recombinant Selectin, Platelet (SELP)

HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白

ERBB3重组小鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein

ALCAM Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD166 / ALCAM 蛋白 (Fc 标签)

APCS重组人 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein

大鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)试剂盒 ，英文名： PTGES2 ELISA Kit

Mouse angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 小鼠血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)试剂盒

Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit 大鼠热休克蛋白20(HSP-20)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGR-Beta(Humanglucocoicoidreceptor-Beta)ELISAKit人糖皮质激素受体β

细胞单胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量试剂盒20次

RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒规格：96T/48T

兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子甲状腺素(T4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠子宫平滑肌原代细胞小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA 试剂盒

Rat annexin V (ANX- V) ELISA Kit 大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)试剂盒

Humansecretieceptor,SRELISAKit 人促胰液素/分泌素受体(SR)试剂盒 进口分装

Humanai-Reticulinaibody,ARA试剂盒人抗网硬蛋白抗体(ARA)试剂盒

植物细胞原生质体电转试剂盒10次

HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit人坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒

RBP4重组小鼠 RBP4 蛋白 Protein

BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 钙激活通道蛋白

VDR重组人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein

CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 标签)

CLEC14A Protein Rat 重组大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。