大鼠羊膜上皮原代细胞

大鼠羊膜上皮原代细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠羊膜上皮细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠羊膜上皮细胞采用蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠羊膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人细胞裂解液   CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人细胞裂解液 小鼠原代主动脉弓平滑肌细胞 小鼠原代毛囊角质细胞

Ⅹ(F10)重组蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

ALOX5AP Protein Human 重组人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 标签)

IL8重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 标签) Protein

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

EFNA4重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

小鼠D(VD)ELISA 试剂盒

Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)试剂盒

HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)试剂盒 进口分装

ChickenLaminin,LN试剂盒鸡层连蛋白/板层素(LN)试剂盒

载玻片细胞IP3R受体蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)试剂盒

鱼类释放激素   ELISA.  

鱼类状腺原酸(T3)ELISAKit   ELISA.  

鱼类(Coisol)ELISAKit   ELISA.  

鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.

大鼠羊膜上皮原代细胞豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)试剂盒 ，英文名： TIMP-1 ELISA Kit

Human factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 人凋亡相关因子配体(FASL)试剂盒

MonkeyInsulin,INSELISAKit 猴胰岛素(INS)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforbFGF-9ELISAKit大鼠碱性成纤维细胞生长因子9

细菌乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量试剂盒20次

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit兔子白介素4(IL-4)试剂盒规格：96T/48T

THPO重组小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签) Protein

ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈碱型乙酰受体M2(抗原)

ELK1重组人 ELK1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

AK2 Protein Human 重组人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 标签)

FGFR4 Protein Mouse 重组小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。