CP913622 丙型脊髓灰质炎病毒PCR试剂免费代测

运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。在专门的区域操作。本试剂盒不但准确、快速、灵敏，还具有以下

特点：
1.  即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单。
2.  预期的 PCR 产物长度为 494 bp。
3.  本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

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Q-PCR技术：      
     实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR不仅实现真正实现了定量，而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点。  
荧光定量PCR所使用的荧光基团可分为两种：荧光探针和荧光染料。
1.使用SYBR荧光染料法来进行荧光定量PCR时，我们首先在PCR反应体系中加入过量SYBR荧光染料。SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后发射一定量的荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。
2.Taqman探针则是利用探针与模板的特异性结合的特点，以及探针内荧光报告基团和淬灭基团的分子特性来实现对PCR进行定量检测。这种方法可以实现高灵敏度，严格针对特定碱基序列的定量实验。