人胰蛋白酶原激活肽（TAP）ELISA

英文名称：Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit      

检测方法：elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存，操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换。 

人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA相关介绍：

一、标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。 

2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

二、注意事项

1.此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。

2.使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟。

3.浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。

4.浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。

5.若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。

6.在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。

7.加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。

8.试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。

三、实验前准备

1.使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。

2.准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等。

3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液。

4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液。

5.用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。

人胰蛋白酶原激活肽（TAP）ELISA操作步骤：

1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）。

2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

10.终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
屎肠球菌 Enterococcus faecium
杀鲑气单胞菌 Aeromonas salmonicida
植物乳杆菌 Lactobacillus plantarum
圆弧青霉 Penicillium cyclopium
戊糖乳杆菌 Lactobacillus pentosus
乳酸乳球菌乳亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis
溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus
热带假丝酵母 Candida tropicalis
青春双歧杆菌 Bifidobacterium adolensentis
普雷恩毛霉 Mucor prainii
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
腊状芽胞杆菌 Bacillus cereus
枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna