人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgAⅠ）酶联试剂

日本IBL诊断新品：人半乳糖缺乏IgA1(Gd-IgAⅠ)酶联试剂介绍：

半乳糖缺乏的IgA1(Gd-IgA1)作为IgA肾疾病发病机制和进展的关键效应分子受到越来越多研究的关注，在过去，人们采用HAA凝集法进行的实验研究表明，IgA肾疾病患者血清中的Gd-IgA1的水平显著高于健康人群或非IgA肾疾病的病人。但是由于多聚糖识别活性的不稳定性，HAA凝集法不适用于大规模研究中的大量样本检测，日本IBL研发的试剂盒使用能够特异性识别Gd-IgA1的铰链序列的单克隆抗体，能够定量检测人血清血浆中的Gd-IgA1。同时由于它的稳定，可适用于大规模的研究中。
Gd-IgAⅠ酶联诊断试剂数据：

产品预期用途

本产品仅供科研用，不用于临床诊断。

此IBL试剂盒能用于人血清和EDTA-血浆Gd-IgA1（半乳糖缺乏型IgA1）的定量检测。

检测灵敏度 (0.488 ng/mL)，检测范围 (1.56-100ng/mL)。

检测原理

该人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgAⅠ）酶联试剂是固相夹心ELISA（酶联免疫吸附测定法）。将第一抗体包被酶标板，加入样品和标准品带反应孔中，作为第一次反应。反应后，加入HRP-结合的二抗进入板孔进行第二次反应。洗去二次抗体后，将四甲基联苯胺（TMB）加入到反应孔中并显色。

检测样本

人血清和EDTA-血浆。

储存条件

2-8℃保存，有效期见试剂盒外包装。

试剂盒成分

1  预包被板：包被有抗Gd-IgA1（KM55）大鼠IgG              96T x 1

2  酶标记抗体：

   (30倍浓缩)HRP标记小鼠抗人IgA）                         0.2mL x 1

3  标准品：             人IgA1                             0.3mL x 2      

4  EIA缓冲液：                                             30mL x 1

5  标记抗体稀释液：                                         6mL x 1

6  显色剂：                                                 15mL x 1

7  终止液：                                                 12mL x 1

8  浓缩洗涤液：                                             50mL x 1

实验操作步骤

准备

1. 洗涤液的准备

试剂盒的洗涤液是一种40倍浓缩液，应稀释为1X洗涤液进行洗板用。如用1950 mL稀释50 mL的浓缩洗涤液，制成2000mL即用稀释洗涤液。

2. 酶标记抗体的准备

试剂盒中的标记抗体是一种30倍浓缩物，根据所需量用标记抗体稀释液稀释。稀释后的标记抗体才能用于检测步骤。

3. 标准品的准备

加0.3 mL的去离子水到瓶装标准品中充分溶解，制成200ng/mL的标准品液，该溶液可冻存，但应避免反复冻融。

标准品的稀释

准备7支试管，并每支各加120 μL EIA缓冲液。

将200ng/mL的标准品120ul加入到试管-1中混匀，制成100ng/mL的标准品，再取100ng/mL的标准品120ul到试管-2中混匀，制成50ng/mL的标准品，以此类推，做2倍倍比稀释，制成100—1.56 ng/mL的标准品系列。