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BY-1265 RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮细胞系

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供货周期 现货 应用领域 化工,生物产业,制药/生物制药
RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮细胞系
RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮细胞系作为源自大鼠食管上段黏膜组织的正常上皮细胞模型,因具备食管上段上皮te有的分化表型及稳态维持能力,在食管黏膜屏障稳态调控、食管癌多区域癌变差异及食管上段黏膜损伤修复研究中具有du特jia值,成为探究食管上段上皮生理功能的重要实验工具。
细胞特性与来源背景:该细胞系源自大鼠食管上段黏膜组织,经原代培养和克隆化筛选获得。细胞形态呈多边形,边界清晰,较 RNEEC/HL-011 细胞略小(直径约 16-20μm),胞质呈弱嗜酸性,可见散在的透明角质颗粒,细胞核呈椭圆形,核仁不明显。生长方式为贴壁生长,呈单层紧密排列,接触抑制现象显著,传代后 24 小时贴壁率达 90%。核心参数表现出食管上段上皮特征:倍增时间约 65 小时,较 RNEEC/HL-011 长 5 小时,连续传代 12 次后仍保持稳定特性;表面标志物表达具有区域特异性,细胞角蛋白 13(CK13)阳性率达 96%,细胞角蛋白 4(CK4)阳性率 94%,EpCAM 阳性率 91%,Ki67 基础阳性率低于 5%,显著低于 RNEEC/HL-011;具有正常二倍体核型(42 条染色体),无染色体异常;细胞间连接更为紧密,跨上皮电阻值达 420Ω・cm²,较 RNEEC/HL-011 高 20%,紧密连接蛋白 claudin-4 表达量增加 30%;无微生物污染,细胞纯度达 97%,保障实验结果可靠性。
科研应用价值:在食管黏膜稳态研究中,RNEEC/HL-012 细胞经机械拉伸刺激后,角质形成细胞生长因子(KGF)表达量增加 4.2 倍,丝聚蛋白(Filaggrin)分泌量提升 3.8 倍,较 RNEEC/HL-011 的响应更为显著,可模拟食管上段应对机械摩擦的稳态调节机制,为解析食管不同区域的屏障适应差异提供对比模型。
食管癌区域差异研究方面,该细胞经亚硝胺处理后,p53 基因突变率为 25%,显著低于 RNEEC/HL-011 的 38%,但细胞周期蛋白 D1 表达量增加 52%,呈现du特的癌变前分子特征,可用于探究食管上段与中段癌变机制的区域差异。
在反流性食管炎研究中,该细胞在酸刺激(pH=4.0)下,跨上皮电阻值下降 28%,显著低于 RNEEC/HL-011 的 40%,IL-8 分泌量增加 2.3 倍,表现出更强的酸耐受能力,适用于评估食管上段黏膜保护药物的特异性疗效。此外,该细胞与迷走神经节细胞共培养时,神经肽 Y(NPY)分泌量增加 3.1 倍,可用于探究神经 - 上皮交互作用在食管上段功能调节中的作用。
培养与保存规范:推荐使用含 10% 胎牛血清的 Keratinocyte-SFM 培养基,添加 0.08ng/mL EGF(浓度低于 RNEEC/HL-011)及 1% 抗生素混合液,培养环境为 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱。培养基每 3 天更换一次,以维持其缓慢增殖特性。传代时,用 PBS 冲洗 2 次,加入专用细胞解离液,37℃孵育 10-12 分钟(较 RNEEC/HL-011 延长 2 分钟),轻轻吹打使细胞脱落,传代比例 1:2,每 6-7 天传代一次,避免频繁传代导致分化异常。
冻存液采用培养基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清混合液,细胞浓度调整为 1.5×10⁶个 /ml(低于 RNEEC/HL-011),经程序降温后液氮保存,复苏存活率达 83% 以上,3 代内恢复正常功能。运输采用干冰冷冻或培养瓶活细胞运输,收到细胞后静置 24 小时,更换培养基后观察形态,确认无异常后进行实验。该细胞系仅限科研使用,操作需符合生物安全规范。
RNEEC/HL-012 大鼠正常食管上皮细胞系以其du特的食管上段上皮表型、更强的屏障稳定性及区域特异性响应特征,在食管区域功能差异研究中具有不可替代的价值,为系统解析食管上皮的区域特异性功能及相关疾病的区域差异机制提供了可靠模型。

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