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Phos-tag® Acrylamide

具体成交价以合同协议为准

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富士胶片和光(广州)贸易有限公司是日本富士胶片和光纯药株式会社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation)在中国的子公司,主营富士胶片和光品牌试剂产品,供应产品超50,000种,囊括了生命科学、药品生产、品质管理领域、合成与材料、分析各个领域。


基于“想要为科研人员提供帮助”的创业初衷,富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)作为一家满足前沿研究领域需求的综合试剂制造商,一直致力于生产和开发高品质的产品,并于2022年6月迎来了创业100周年。通过发挥企业优势“技术力”,以及三大核心业务的试剂业务、化成品业务和临床诊断业务来满足学术界、企业以及医疗相关企业的广泛需求。


凭借100 年的历史经验,富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)在日本市场占据高份额,作为全球性的试剂供应商,以“成就科学未来之力,创造幸福源泉”为愿景,致力于高品质试剂的生产与开发。通过提供试剂,为再生医疗、癌症、精神/神经疾病和抗体药物等各类基础研究和前沿研究做贡献,并获得 ISO9001等多项国际认证。基于可靠的技术和品质以及科研人员之间的信赖,作为富士胶片集团的一员将不断实现全球化发展。


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主要业务——试剂


作为富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)试剂业务的中国子公司,富士胶片和光(广州)贸易有限公司可提供各个领域测试和研究用途的生命科学试剂和化学试剂。


试剂业务

可广泛提供生命科学和化学领域的测试研究用产品



生命科学领域


化学领域



 

培养基生产

 ● 抗体制备

 ● 定制服务



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认证标准品

 ● 有机化学


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作为优质的试剂企业,我们可以提供满足不同客户需求的高品质产品。试剂业务自创业以来,已持续不断地提供了广泛领域的试剂产品,并致力于成为满足前沿技术领域各项研究需求的试剂制造商。今后也将以过往技术经验为基石,发挥作为可信赖的研究支持合作伙伴的作用。



产品一览

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● 常规试剂

● 有机合成试剂

● 环境分析试剂

● 精密分析试剂

● 色谱试剂

● 生化学用试剂

● 基因研究用试剂

● 免疫研究用试剂

● 病理研究用试剂

● 细胞培养用试剂

● 内毒素检测用试剂

● 生物药生产用培养基

● 研究用基础培养基

● 定制服务

● 设备和耗材










丰富的产品类目以及快速供应体系

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致力于持续监测市场的需求并跟踪世界的研究动向。为了能够及时准确地响应客户的需求,富士胶片和光建立了以自有品牌为中心的丰富产品体系,为各界的研究和开发领域提供细致的服务与支持 。













高品质的试剂提供和生产体系

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试剂生产工厂以东京工厂和大阪工厂为中心,发挥优质技术力量建立的高品质生产体系。爱知工厂配备齐全的培养基生产设备,可用于生产再生医疗和生物制药生产用的培养基。













优质的客户服务和产品信息

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通过定期更新的主页网站、富士胶片和光生物微信公众号、富士胶片和光化学分析微信公众号,以及不定期的富士胶片和光生物视频号、网络研讨会和线下展会,致力于为客户提供优质的服务以及不断更新的产品信息。













强化全球化事业的开展

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建立日本海外销售体系,通过提供富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)优质研发力量生产的高品质产品,积极推进全球化业务。














企业历史沿革


年份

内容

1922年6月

  从武田長兵衞商店(现武田薬品工業株式会社)的化学药品部门独立出来,成立了武田化学薬品

 株式会社

1940年

  大阪工厂竣工

1944年

  東京工厂竣工

1947年

  更名为和光純薬工業株式会社

1950年

  展开化成品业务

1952年

  总部迁移至大阪

1960年

  展开临床检测药业务

1968年

  播磨工厂竣工

1972年

  公司总部竣工

1974年

  成立德国和光純薬有限会社(今・FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH)

1981年

  成立美国和光純薬株式会社(今・FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation)

1989年

  建设东部配送中心

1991年

  建设西部配送中心

2004年

  愛知工厂竣工

2012年

  成立和光純耀(上海)化学有限公司(今・富士胶片和光纯药(上海)化学有限公司)

2015年

  收购株式会社シバヤギ(今・群馬办事处)

2017年

  成为FUJIFILM Corporation的全资子公司

2018年

  更名为富士胶片和光纯药株式会社

2019年

  合并IS Japan Co.,Ltd.(今・户田办事处)

2022年

  成立100周年





























生物化学试剂、仪器和耗材

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

用于通过 SDS-PAGE 分离磷酸化蛋白质Phos-tag® Acrylamide

Phos-tag® Acrylamide


仅需将Phos-tag® Acrylamide与丙烯酰胺溶液混合并聚合,即可生成用于分离磷酸化和非磷酸化蛋白质的Phos-tag® SDS-PAGE。

在不使用放射性同位素的情况下,利用 Phos-tag™ SDS-PAGE 即可分离不同条带中的磷酸化和非磷酸化蛋白。分离后的凝胶可用于 Western blotting 和质谱分析等后续实验。

Phos-tag™ SDS-PAGE 操作简单,只需在常规 SDS-PAGE 胶中加入 Phos-tag™ Acrylamide 和 Mn2+ 或者 Zn2+ 即可进行实验。在电泳过程中,磷酸化蛋白的磷酸基团与 Phos-tag™ 中的二价金属离子相结合,降低其迁移速度,从而可区分磷酸化与非磷酸化蛋白。


Phos-tag® Acrylamide



优点、特色


● 采用 Phos-tag™ SDS-PAGE 可轻松分离磷酸化蛋白

无任何放射性元素及化学标记!

不论氨基酸残基的类型/位点如何,均可使用

可用于未知的磷酸化分析

可用于检测新的磷酸化位点(无需购买商品化磷酸化抗体、无需特意制备磷酸化抗体)

磷酸化位点数量/位点不同的磷酸形式也可分离

显示磷酸化程度和磷酸化形式

可同时检测磷酸化/非磷酸化形式

可定量各种磷酸化形式

可简单明确有无磷酸化

无需RI或特殊的仪器

实验成本低,操作简单。(SDS-PAGE的试剂→只要有设备即可使用)

电泳后可用于WB、MS分析,也可用于二维电泳

WB:可分析内源性蛋白

MS:可显示各磷酸化形式的磷酸化位点的组合

二维电泳:可分离相同等电点和分子量的磷酸化形式

适用于内源性蛋白的磷酸化分析!



Phos-tag® SDS-PAGE的原理


Phos-tag® Acrylamide的结构


Phos-tag® Acrylamide


Phos-tag® Acrylamide


1. 电泳中的磷酸化蛋白会被2个二价金属离子捕获

2. 磷酸化水平越高,电泳速度越慢

3. 根据磷酸化水平进行分离(即使磷酸化位点的数量相同,只要位置不同也可进行分离)

常规的SDS-PAGE(上图:非Phos-tag® 条件下)中,无法确认底物是否被磷酸化。



案例、应用


Phos-tag® Acrylamide



Phos-tag® Acrylamide



【使用Phos-tag™ SDS-PAGE的磷酸化/非磷酸化蛋白比较】


“我推荐使用Phos-tag ™ ——东京大学研究院医学研究科 小川觉之”


  Phos-tag ™ 是专为研究磷酸化蛋白而新开发出来的试剂。此产品使用方便,不但可用于体外实验,还能定量分析体内蛋白的磷酸化水平。Phos-tag ™ SDS-PAGE 可用于常规电泳实验,无需购买特殊设备,性价比高。传统蛋白磷酸化的研究需要特异的磷酸化抗体、RI 等其它试剂,操作复杂,花费大,且放射性元素会有安全隐患,而 Phos-tag ™ 的出现恰恰可以弥补这些缺点,为磷酸化蛋白研究提供新的方向。


磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白利用Phos-tag ™ SDS-PAGE 的分离效果图


Phos-tag® Acrylamide


  Lane 1 为非磷酸化蛋白,Lane 2-5 为磷酸化蛋白,各蛋白因磷酸化状态不同而条带迁移率也有所不同。

  磷酸化/ 非磷酸化蛋白的数量比、磷酸化程度、磷酸化蛋白的丰度等都可根据条带迁移和条带浓度求得。


【资料提供】

日本东京大学研究生院医学系研究科



【二维电泳中的应用:分析 hnRNP K 磷酸化异构体】


  小鼠巨噬细胞 J774.1 经 LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到 hnRNP K 。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是 Phos-tag ™ SDS-PAGE,可分离 hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。


二维电泳


Phos-tag® Acrylamide


  同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)


【参考文献】

Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics , Nov 2010; 10(21): 3884-95.


【结果提供】

  横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)理化学研究所 RCAI 小原收



【EGF 刺激前后MAPK 磷酸化水平的变化】


  常规 SDS-PAGE 和Phos-tagTM SDS-PAGE 后迚行克疫印迹实验分析 EGF 刺激的 A431 细胞中 MAPK 磷酸化水平。


Phos-tag® Acrylamide

  

摘自 Kinoshita-Kikuta, E. et al., Mol.Cell. Proteomics. (2007)6: 356.



【使用示例:α-酪蛋白去磷酸化反应随时间的变化】


使用Phos-tag® SDS-PAGE和常规SDS-PAGE分离碱性磷酸酶随时间(孵育时间:0~120 min)去磷酸化的α-酪蛋白样品。


Phos-tag® Acrylamide



相关产品


 产品名称

 用  途

 Phos-tag™ Acrylamide

 分离: SDS - PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白

 SuperSep Phos-tag™

 分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide

 Phos-tag™ Biotin

 检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体

 Phos-tag™ Agarose

 纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白

 Phos-tag™ Mass

 Analytical Kit

 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度


phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发,对应指导手册请通过以下链接获取:

http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/pdf/show/19.html



操作视频,请点击:


样品处理(TCA沉淀):http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/47.html

凝胶制备:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/48.html


已公开的验证蛋白列表,请查看链接:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/gories/show/123.html





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