产品名称:ProteanFect CRISPRMax Ultra原代细胞转染试剂
产品品牌:西湖凝聚体
买试剂,找华雅,更多生物试剂,就在华雅思创生物
ProteanFect CRISPRMax Ultra转染试剂PT08 产品介绍
西湖凝聚体推出的ProteanFect CRISPRMax Ultra,是解决原代细胞转染难题的革新方案。通过非病毒递送系统,该试剂可精准导入Cas9/sgRNA复合物,在人原代T细胞中实现超80%的TRAC基因编辑效率,适用于免疫·治疗与基因功能研究。
产品特点
原代细胞优化:添加Reagent C,增强转染稳定性,配合CD3/CD28磁珠活化策略,显著提升编辑成功率。
灵活适配:支持悬浮转染(如消化贴壁细胞)与贴壁直接转染,满足多样化实验需求。
快速验证:EGFP mRNA阳性对照5-48小时即可观察荧光表达,大幅缩短实验周期。
高性价比:冻干试剂长期保存,开封后按需使用,降低实验成本。
代理现货供应
华雅思创生物®作为西湖凝聚体核心代理商,提供ProteanFect CRISPRMax Ultra现货及定制服务,下单即发,全程技术指导!
华雅思创生物公司介绍
华雅思创生物®深耕生物医药领域,产品覆盖合成生物、医美保健等前沿方向。“买试剂,找华雅”,我们以品质与高效服务,赋能全球科研创新!
产品名称:ProteanFect CRISPRMax Ultra原代细胞转染试剂
产品品牌:西湖凝聚体
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常见问题
如何提升转染效率 转染条件需根据细胞类型和培养条件进行优化。、
建议:1)延长转染时间:根据细胞状 态适当延长转染时间。通常原代细胞不超过 30 分钟,细胞系不超过 2 小时。2)提升 ProteanFect 转染量:适当增加转染体系至初始的 1.5-2.5 倍。
2. 细胞系转染前处理 1)为获得良好的转染效率,建议使用活性超过 90%的细胞,可以通过台盼蓝染色测定 细胞活性。2)不建议使用传代次数超过 15 次的细胞进行实验。3)新复苏的细胞在转染实 验前需传代 2-3 次,待细胞恢复正常生长后使用。
3. 原代细胞转染前预处理 对于原代细胞,充分活化有助于提高转染效率,因此建议在适当活化后进行转染。例如, 人原代 T 细胞可使用 CD3/CD28 磁珠或抗体进行激活,激活 2-10 天内均可转染。(详细操 作和技巧可参考微信公众号“西湖凝聚体”中的转染攻略→人原代 T)。
4. 关于试剂盒中 EGFP mRNA 阳性对照的使用建议 首·次尝试时,建议设置阳性对照组(EGFP mRNA),以检测实验操作和试剂的有效性。 使用 96 孔板的细胞量即可,节省细胞和试剂。具体操作见表 2。
5. RNP 的投入量如何确定 RNP 中 Cas9 蛋白和 sgRNA 的摩尔比推荐在 1:1-1:2.5 之间。以 96 孔细胞量的转 染体系为例,Cas9 蛋白的投入量在 0.8 μg-1.6 μg ,已能够达到单基因编辑的理想效率。
6. 转染时的细胞数范围 说明书中提供了最佳转染条件下的细胞数量范围,但在特殊情况下,即使细胞数量较少, 也可以进行转染。以 96 孔板为例,建议细胞数量不低于 4×10³/孔,以确保后续检测的可靠 性。
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