【摘要】:羟胺氧化还原酶(Hydroxylamine Oxidoreductase,HAO)是一种氧化还原酶,主要催化羟胺的氧化还原反应。在生物体内,它参与氮循环和含氮化合物的代谢过程。根据存在形式和催化特性的不同,羟胺氧化还原酶可以分为铁-硫蛋白型羟胺氧化还原酶和辅酶型羟胺氧化还原酶。前者主要存在于古菌、细菌等原核生物中,后者则主要存在于真核生物中。
土壤处理方案:
1, 称取土壤500mg左右,必须保持鲜重,按照重量和体积比加入1:9的PBS溶液(PBS的浓度为0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4),例如称取的是0.5g加入5ml的PBS,称取的重量不要求保持一致,但匀浆的比例都是按照1:9的关系来。
2, 进行涡旋震荡,充分混匀,涡旋时间30秒。
3, 离心取上清,离心转速为4000转每分,时间为15分钟左右,取上清液待检。
羟胺氧化还原酶(HAO)ELISA试剂盒 活性检测需要但未提供的材料及耗材:
1、酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、精密移液器、吸头、加样槽
3、蒸馏水或去离子水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、EP 管
7、无粉一次性乳胶手套
【储存条件及有效期】:
1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期 6 个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自 封袋,并将全部试剂放回 2-8℃冰箱。
注意:试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用 后的剩余试剂盒建议在实验后 1 个月内使用完毕。产品过期 时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
羟胺氧化还原酶(HAO)ELISA试剂盒 活性检测组成及其配置(检测范围请参考说明书)
产品名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 保存条件 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 2-8℃ |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 2-8℃ |
稀释液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 2-8℃ |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
底物B | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
终止液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
封板膜 | 2张 | 2张 | 2-8℃ |
说明书 | 1份 | 1份 | 2-8℃ |
自封袋 | 1个 | 1个 | 2-8℃ |
操作注意事项:
1. 实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性。
3. 孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
上海轩泽康生物有限公司
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