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P67993-pLV3-CMV-IL27RA(human)-3×FLAG-Puro

2025-05-17

产      地:
上海
所在地区:
上海
有效期还剩 364举报该信息

名称pLV3-CMV-IL27RA(human)-3×FLAG-Puro
别称NM_004843.4;CRL1; IL-27RA; IL27R; TCCR; WSX1; zcytor1;
基因长1908bp
质粒宿主哺乳细胞,慢病毒
质粒用途蛋白表达
片段类型ORF
片段物种
原核抗性Amp
筛选标记Puro
启动子CMV
复制子pUC
感受态Stbl3
温度pLV3-CMV-MCS-3×FLAG-Puro
背景载体pLV3-CMV-MCS-3×FLAG-Puro
正向引物CMV-F



注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0 1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

4
42热激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

6
6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9
、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒



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