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P67990-pCAGGS-HA-ISG15(human)

2025-05-17

产      地:
上海
所在地区:
上海上海市
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注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0 1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

4
42热激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

6
6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒


pCMV-RFPL4A(human)-Neo
pLV3-CMV-IL27RA(human)-3×FLAG-Puro
pgtshβ(fish)-AVPR2(human)-T2A-EGFP
pLV3-CMV-USP21(human)-3×FLAG-Neo
pLV3-CMV-NES-PhoCl2c-mCherry-Puro
pCMV-HOXC9(human)-3×FLAG-Neo
pCMV-PSIP1(human)(1同义突变)-Neo
pCMV-Eif4g3(mouse)-3×Myc-Neo
pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA4-Cas9-EGFP-EF1a-Puro
pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA3-Cas9-EGFP-EF1a-Puro
pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-EF1a-Puro
pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA1-Cas9-EGFP-EF1a-Puro
pLV3-U6-TXNRD1(human)-shRNA3-Puro
pLV3-U6-SLC22A3(human)-shRNA1-CopGFP-Puro
pLV3-U6-HTRA2(human)-shRNA1-CopGFP-Puro
pLV3-U6-ALDH2(human)-shRNA1-EF1-Puro
pLV3-U6-Sting1(mouse)-shRNA1-EF1-Puro
pLV3-U6-GPC1(human)-shRNA2-Puro
pLV3-U6-RAC1(human)-shRNA1-Puro
pLV3-U6-SREBF2(human)-shRNA1-Puro

pLV3-U6-SC5D(human)-shRNA1-Puro


pCAGGS-HA-ISG15(human)








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