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美德声推出细胞过敏原刺激试验ELISA试剂

产品简介

过敏原与嗜碱性粒细胞和肥大细胞等特殊细胞上的 IgE 分子接触时会产生和/或分泌过敏介质，例如白三烯或组胺。与组胺相反，在假性过敏的情况下，白三烯也被合成和释放，反应类似于过敏，但不涉及任何 IgE 分子。

CAST® ELISA 即细胞过敏原刺激试验试剂，也可以被视为体外过敏激发试验。收集的患者白细胞血液分数将在体外暴露于可疑的特定过敏原。孵育后，细胞上清液将通过高度特异性的 ELISA 检测磺胺三烯的从头合成。

该测试不仅可以检测 IgE 介导的过敏，还可以检测假性过敏。后一种过敏以阿司匹林 （ASA） 和其他非甾体抗炎药 （NSAID） 以及各种其他药物或食品添加剂而闻名。

CAST® ELISA 的主要应用

CAST® 检测可用于确认任何 IgE 介导的过敏，但经典检测（病史、皮肤试验、规格 IgE）的结果存在争议。有关过敏特定领域的更多信息，请对细胞过敏进行独立测试。

检测原理

美德声CAST® ELISA 是一种基于酶联免疫吸附测定（ELISA）的技术，用于测量白细胞在受到过敏原刺激后释放的硫化白三烯（sLT）。测试过程包括以下几个步骤：

1.       白细胞分离：患者血液中加入右旋糖酐增加粘度，红细胞沉降后，白细胞和血小板留在血浆中。通过离心分离白细胞，并在含有白细胞介素3（IL-3）的刺激缓冲液中重悬。

2.       细胞刺激：白细胞在37°C下孵育40分钟，以刺激其释放sLT。刺激后，细胞通过离心分离，上清液用于ELISA检测。

3.       白三烯测定：使用预先包被的多克隆抗小鼠IgG的微孔板进行ELISA检测。细胞上清液、标准品和对照品与酶标记的白三烯D4和特异性抗sLT抗体一起孵育。通过添加底物溶液（pNPP）和停止溶液（2N NaOH）来测量吸光度。

试剂供应与准备

·       细胞分离和刺激试剂：包括右旋糖酐溶液、含有IL-3的刺激缓冲液、抗IgE受体抗体和fMLP的刺激对照。

·       ELISA试剂：包括预先包被的微孔板、洗液、ELISA缓冲液、标准品、对照品、酶标记物、抗体、底物溶液和停止溶液。

样本采集与储存

·       样本要求：建议患者在采集样本前避免使用抗组胺药、皮质类固醇或色甘酸钠等抗过敏药物。

·       样本储存：采集的全血应在2-8°C下储存，避免离心或冷冻。

检测程序

1.       标准曲线制备：通过系列稀释标准品制备标准曲线。

2.       细胞刺激：根据样本量和试剂体积进行细胞刺激。

3.       ELISA程序：包括微孔板的洗涤、标准品和样本的添加、酶标记物和抗体的孵育、底物溶液的添加以及吸光度的测量。

结果计算

·       标准曲线：通过测量每个标准品的吸光度，绘制标准曲线。

·       样本和对照：测量样本和对照的吸光度，计算sLT浓度。

质量控制

·       空白吸光度：<200 mOD

·       50%结合剂量（ED-50）：200-400 pg/mL sLT

·       患者背景：<200 pg/mL sLT

·       刺激对照：>200 pg/mL sLT

结果解释

·       刺激对照：在过敏和非过敏个体中，刺激对照的净刺激产量（扣除背景后）应至少为200 pg/mL。

·       过敏原刺激：对于吸入性和食物过敏原，建议净刺激产量高于200 pg/mL sLT视为阳性。

性能特征

·       细胞刺激动力学：sLT的产生在40分钟孵育后达到稳定。

·       ELISA精密度：2.5小时出结果。

适用范围

·       临床应用：用于诊断和监测炎症性疾病，如炎症性肠病（IBD）。

·       研究应用：用于研究过敏反应和其他炎症性疾病的发病机制。

订购信息

通过CAST® ELISA，临床医生可以更准确地诊断和监测炎症性疾病，从而优化患者的治疗方案。

我们的用户

美德声提供的产品广泛应用于各类临床实验室，公共卫生中心实验室，CDC疾病控制中心实验室等需要高质量检测单位。

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