细胞培养注意事项（入门篇）2025/05/30

1细胞房和生物安全柜先开紫外照射30min作用：对环境灭菌（空气）。（备注：如果着急，至少也要开15分钟），在做实验之前考虑好需要哪些物品。开始照射之前，将所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超净工作台）里面。常用移液枪或电动移液器等，需要在工作台上放置一套专用设备。细胞培养箱一般都已经调整好。定期留意一下二氧化碳是否足够。不够及时更换。2显微镜需要定期消毒酒精擦拭注意：显微镜一般都放在细胞房。3进入实验之前首先给自己带上拖鞋、头套，口罩，实验服，手套（手套带双层）。注意：手套要将袖口套进去。实

SCL胎牛血清2024/04/22

更多产品更多品牌现货供应，敬请荷兰SCL公司成立于1992年，早年一直是几大血清销售商的OEM供应商，自2002年开始通过自主销售，目前已成为欧洲及美洲地区的血清供应商。SCL血清原材料都通过先进的心脏穿刺采血技术采自于天然放牧为主、疾病少、未发生疯牛病（BSE）和口蹄疫（FMD）疫情的健康牛群，生产的血清产品符合欧盟（EU）及美国农业部（USDA）标准。所有生产流程均在GMP厂房进行，并通过ISO9001认证，拥有CE标识与欧洲药品质量管理局安全许可证书，符合欧洲药典检测标准。SCL公司一贯重

胎牛血清质检标准解读2024/04/22

【胎牛血清】胎牛血清(fetalbovineserum，FBS)指通过对未出生的胎牛行穿刺采血，再经自然层析、离心、过滤等处理而得到的上清液。在细胞培养体系中，血清是不属于人工合成的成分，同时也让血清成分成为细胞培养体系中最大的不确定因素，因此，如何保障胎牛血清的质量是细胞培养得好坏的决定性因素之一。【胎牛血清的检测指标】胎牛血清的COA中，常规的检测标准包括内毒素、总蛋白、支原体、细菌、病毒、渗透压、总蛋白等。胎牛血清产品分析证书（COA）就是FBS质控的重要体现。【理化检测】外观胎牛血清外观

细胞消化不下来？如何解决？2024/04/15

细胞消化不下来？小伙伴们在给贴壁细胞传代的时候有没有遇到细胞消化不下来的情况呢？有时候等了10分钟甚至20分钟细胞仍岿然不动，继续等待怕消化过度，暴力吹下又怕对细胞造成机械损伤，可谓进退两难。1.细胞贴壁紧不同种类的细胞贴壁的松紧程度是不一样的，比如293系列细胞贴壁很松，是晃一晃就可能掉下来的程度。而MCF10A细胞却贴壁很紧，可能需要消化5-10min甚至更久才能脱落。在培养一株细胞之前，可以问问有经验的师哥师姐或者上网查资料确认这株细胞大概消化多久，做到知己知彼百战百胜。解决方案：若您培养

细胞污染是怎么造成的2024/01/03

细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等仪器设备以及的实验服和拖鞋，未定期消毒。物品被带出细胞房使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用（通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用）。细胞培养中常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理（只有扔）。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？接下来一起来了解一下。一、违规操作：1.为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min

原代培养技术的注意事项2023/12/08

一、注意污染1、严格进行动物皮肤消毒，使用三套器械取材。新生动物皮肤先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。2、严格进行无菌操作，防止细菌、霉菌、支原体污染，避免化学物质污染。自取材开始，保持所有组织细胞处于无菌条件。细胞计数可在有菌环境中进行。3、吸取液体前，瓶口和吸管进行火焰消毒；吸取液体时，避免瓶口和吸管碰撞。4、离心管入台前，管口、管壁应消毒。5、实验者离开超净台时，要随时用肘部关闭工作窗。6、使用过的器械用酒精棉球擦去血污后，移入另一个器皿中继续消毒，在浸

细胞消化不下来？如何解决2023/11/24

细胞消化不下来？小伙伴们在给贴壁细胞传代的时候有没有遇到细胞消化不下来的情况呢？有时候等了10分钟甚至20分钟细胞仍岿然不动，继续等待怕消化过度，暴力吹下又怕对细胞造成机械损伤，可谓进退两难。小尚为大家总结了细胞难消化的原因，以及对应的处理方式：1.细胞贴壁紧不同种类的细胞贴壁的松紧程度是不一样的，比如293系列细胞贴壁很松，是晃一晃就可能掉下来的程度。而MCF10A细胞却贴壁很紧，可能需要消化5-10min甚至更久才能脱落。在培养一株细胞之前，可以问问有经验的师哥师姐或者上网查资料确认这株细胞

细胞培养科普2023/11/10

细胞是生命的基本单位，它们构成了我们身体的组织和器官。而细胞培养则是一种让细胞在实验室中生长和繁殖的技术，为科研提供了深入研究细胞行为和开展生物医学研究的重要工具。为什么进行细胞培养？细胞培养可以帮助科学家们更好地理解细胞的生理和病理过程。通过在实验室中控制细胞的环境条件，如温度、湿度和培养基的成分，可以模拟和研究不同的生理和病理状态，例如细胞的生长、分化、增殖和响应药物的能力。细胞培养的应用领域细胞培养在许多领域中都有广泛的应用。在生物医学研究中，它可以用于研究癌症、感染性疾病、神经退行性疾病

无血清培养基的优势有哪些2023/10/23

无血清培养基（serum-freemedium,SFM）系指不含任何血清成分的合成培养基。近年来，因为细胞治疗（celltherapy）的快速发展与生物工业上的制备抗体、病毒抗原或是重组蛋白表达时，细胞培养基中的血清成分复杂，可能会影响制程或是增加不稳定的因素，因此，无血清培养基成为其目标，现今已有许多成熟的产品可供应研究人员做选择。顾名思义，无血清培养基（serum-freemedium,SFM）系指不含任何血清成分的合成培养基。近年来，因为细胞治疗（celltherapy）的快速发展与生物工

ELISA试剂盒实验时为什么一定要保温2023/10/08

elisa试剂盒实验时为什么需要保温?因为ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避

ELISA试剂盒的参考标准介绍2023/09/13

第一、标准曲线1.定量方法：标准曲线至少由5个浓度组成，测定次数不少于5次，以确定工作浓度范围和IC50范围。2.定性方法：工作浓度范围通过阴性、临界值浓度和阳性的样品测定来确定，每个浓度重复不少于5次，浓度与响应值之间应有一定的关系。第二、检测限和定量限1.检测限：20份空白样品测定均值加3倍标准差。2.定量限：应大于标准曲线中浓度点。对于定量方法，应对该浓度样品至少测定6次进行验证，而不能通过外延法推断。第三、临界值（cut-off值）的确定对于有残留余量的药物，检测方法的临界值为20份添加

实验室问题解答QA2023/09/06

一、标准溶液是自己配制出来的，它属于标准物质吗？要怎么做期间核查呢？参考解答：标准溶液是自己配制出来的，它属于标准物质，需要做期间核查（如果在很短时间内用完了，这种情况不用核查）期间核查时候要区别是CRM还是RM，一般核查的时候主要关注标准物质1、性状是否发生变化2、是否在有效期内3、外观是否变化，比如是否浑浊4、保存的环境条件是否合适必要时可以用些技术手段看看试剂值是否发生明显变化。但是实验室一般不能对标准物质进行定值。标准物质值是否变化和对标准物质定值是2个问题。二、作为企业内部实验室，因涉

牛血清白蛋白（BSA）的应用2023/08/29

牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一种球蛋白，包含607个氨基酸残基，分子量为66.446KDa，等电点为4.7。应用：牛血清白蛋白（BSA）在生化实验中有广泛的应用，例如在WB实验中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性减轻不利环境因素，如加热、表面张力及化学因素引起的变性。测定蛋白浓度按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白标准）+90ulPBS液稀释成0.5mg/ml的蛋白标准液。再分别以0、1、2、4、8、12、16、

细胞培养的整个过程都是怎么样的？2023/08/17

当你进行细胞培养时，通常会经历以下几个基本步骤：1.细胞培养基配制：准备适当的培养基，包括培养基基础成分、补充物和生长因子等。培养基的配制需根据细胞类型和实验要求进行优化。2.细胞准备：从细胞库或前一次培养的细胞中获取需要培养的细胞株。细胞通常以冻存备份的形式存储，需要先进行解冻复苏。3.细胞接种：将复苏后的细胞以适当的细胞密度接种到含有培养基的培养皿或培养瓶中。细胞接种密度需根据细胞类型和实验要求进行控制。4.培养条件控制：提供适宜的培养条件，包括温度、湿度和CO2浓度等。这些条件可以通过培养

几种常用的免疫学技术知识简介2023/08/09

免疫学技术：是指在免疫学长期发展过程中形成的一套特别的研究手段和计数，包括人工免疫防治技术（疫苗和血清）和免疫检测技术（抗原抗体检测和机体免疫功能检测）免疫学研究涉及到的重要技术包括：单克隆抗体技术、T细胞克隆技术、转基因及基因编辑技术、分子杂交技术、聚合酶链反应技术等。常用的免疫学技术：1．免疫荧光技术免疫荧光技术是利用荧光素标记的抗体（或抗原）检测组织、细胞或血清中的相应抗原（或抗体）的方法.由于荧光抗体具有安全、灵敏的特点,因此已广泛应用在免疫荧光检测和流式细胞计数领域.根据荧光素标记的方

无血清细胞培养基与血清细胞培养基的区别2023/08/03

无血清细胞培养基与血清细胞培养基哪个好？很难一句话来说。但可以从几个方面分别比较。1.产品性能方面无血清培养基更好。血清并不是生来就为养细胞而来的。血清是全血的一部分，组分很复杂，有150多种已知组分组分，多种未知组分。这些组分中，有些对细胞生长是有利的，有些对细胞生长是无作用的，有些对细胞生长反而是有害的。另外，不同的牛，由于其体质不同，其血清中各种组分的差异很大。比如血清中的EGF，有的含量为10ug/ml，有的仅为2ug/ml，相差了5倍。有时你用的血清不好用，不是你的运气差，很多时候也不

胎牛血清（FBS）知多少2023/08/03

胎牛血清血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品质高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。胎牛血

PBS磷酸盐缓冲液的配置方法及作用2023/07/24

PBS缓冲液，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI，一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二级解离，缓冲的PH值范围很广，而NaCI和KCI主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2，以提供二价阳离子。配置方法：称取8.0gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4、0.24gKH2PO4溶于800ml蒸馏水中，用HCI调节溶液至7.4，

新生牛血清的成分2023/07/17

1.蛋白质新生牛血清中的主要成份中除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外，主要还有白蛋白，球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞附着;胎牛血清中含胎球蛋白促细胞依附;转铁蛋白可以结合铁离子，减少其毒性会被细胞利用的可能。2.多肽血小板促生长因子能促细胞分裂，据专人介绍新生牛血清是多肽家族的重要成员，多肽拥有着重要的作用，比如它可以促进细胞增殖因子数量的增加，不仅如此，它还能够促成纤维细胞生长因子以及神经细胞生长因子等，据悉，虽然从数量上来看新生牛血清的含量比例少，但它能够促进细胞的增长。3.激

细胞培养的原理和步骤2023/06/27

细胞培养的基本原理：细胞传代（生存空间和营养不足，长得太密，代谢废物太多，要洗洗，同时也要分离出一部分细胞，要加入新的培养液），换液（生存空间和营养剩余，但是代谢废物太多，要洗洗，要吃饭，才能长好，所以要洗和加入新鲜培养基），冻存（太多了，先存起来，液氮里面里就是低温，保存能量，活得久），复苏（解冻，恢复吃饭的能力，恢复生长。）这四步。细胞培养的基本步骤（一定要明白每个步骤的意义和目的）：01细胞传代（贴壁细胞）：试剂：PBS,胰酶，含血清的培养基；流程：显微镜下看一看培养皿里的细胞多不多，太多